|
|
|
||
|
Hlavním cílem předmětu Praktická cvičení z buněčné biologie je, aby studenti získali představu, jak vypadá živá<br>
buňka a její součásti v mikroskopu a osvojili si základy práce s mikroskopem. Tyto znalosti jsou důležité pro řadu<br>
navazujících předmětů. V průběhu studia se studenti seznámí s mikroskopem, vyzkouší si přípravu nativních<br>
preparátů s živočišnou i rostlinnou buňkou.<br>
Témata: Mikroskop, Osmotické jevy v buňce, Projevy genotypu a fenotypu, Počítání HeLa buněk v Bürkerově<br>
komůrce, Pozorování Paramecium caudatum, Pozorovnání mitózy u rostlinné a živočišné buňky
Poslední úprava: Svobodová Zuzana, Mgr., Ph.D. (01.09.2025)
|
|
||
|
Praktická cvičení jsou zakončena udělením zápočtu.
Poslední úprava: Svobodová Zuzana, Mgr., Ph.D. (01.09.2025)
|
|
||
|
Praktické cvičení 1
Teorie 1: Mikroskopy, nativní a trvalý preparát
Protokol 1: Jak pracovat s mikroskopem, Poslední úprava: Svobodová Zuzana, Mgr., Ph.D. (01.09.2025)
|
|
||
|
Pracoviště: Katedra biologických a lékařských věd, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta Hradci Králové Název předmětu: Praktická cvičení z buněčné biologie
Téma 1: Mikroskopy, nativní a trvalý preparát Sylabus – světelný mikroskop, příprava preparátů nativních a trvalých, mikroskopování nativního preparátu
Výsledky učení Zadání pro znalosti: • Popište jednotlivé části mikroskopu a vyjmenujte jejich funkce. • Charakterizujte termíny: zvětšení mikroskopu, rozlišovací schopnost mikroskopu, numerická apertura. • Vysvětlete rozdíl mezi světelnou a elektronovou mikroskopií. • Vysvětlete rozdíl mezi nativním a trvalým preparátem u obou uveďte příklad. • Vysvětlete rozdíl mezi vitálním a nevitálním barvením. • Uveďte příklady vitálních barviv a jakým způsobem barvení vybrané tkáně probíhá. • Popište v bodech správný postup mikroskopování.
Zadání pro dovednosti: • Trvalý preparát živočišné tkáně pozorujte při různých zvětšeních a vypočítejte celkové zvětšení pro jednotlivá pozorování. • Rozhodněte, které celkové zvětšení je nejlepší pro pozorování konkrétních struktur a své tvrzení zdůvodněte • Dle protokolu připravte nativní preparát epiteliálních buněk úst • Popište tvar a viditelné struktury v buňce při maximálních zvětšení Vašeho mikroskopu.
Téma 2: Osmotické jevy v buňce Sylabus – osmóza, hypotonické prostředí, hypertonické prostředí a jeho efekty v živočišné a rostlinné buňce Výsledky učení Zadání pro znalosti: • Vysvětlete proces osmózy. • Popište, jak probíhají osmotické jevy v živočišné buňky. • Popište, jak probíhají osmotické jevy v rostlinné buňce. • Vysvětlete termíny plazmorhiza a plazmoptýza. • Vysvětlete termíny plazmolýza, deplazmolýza, křečová plazmolýza. Zadání pro dovednosti: • Pomocí mikropipety si vyzkoušejte přenášení přesného objemu kapalin. • Pozorujte erytrocyty v izotonickém prostředí a chování erytrocytů vysvětlete. • Pozorujte erytrocyty v hypotonickém prostředí a chování erytrocytů vysvětlete. • Pozorujte erytrocyty v hypertonickém prostředí a chování erytrocytů vysvětlete.
Téma 3: Genom, gen, genotyp, fenotyp, karyotyp, karyogram, mutace Sylabus – Drosophila melanogaster, chromozomy, typy dědičnosti, genotyp a fenotyp
Výsledky učení Zadání pro znalosti: • Popište pojmy jako genom, gen, genotyp, fenotyp, karyotyp, karyogram a mutace. • Vysvětlete principy autozomální a gonozomální dědičnosti, včetně rozdílu mezi dominantní a recesivní dědičností. • Popište význam Drosophila melanogaster jako modelového organismu ve výzkumu genetiky. • Určete znaky fenotypů u různých mutantních a standardních linií druhu Drosophila melanogaster (např. barva očí, tvar křídel). Zadání pro dovednosti: • Použijte laboratorní vybavení (Petriho miska, lupa, štětec) k třídění Drosophila melanogaster podle fenotypu a pohlaví. • Zaznamenejte a analyzujte pozorované fenotypové znaky jedinců, rozlište mutantní linie a určete dědičnost jednotlivých znaků. • Na základě zadaných genotypů předpovězte fenotypové vlastnosti jedinců (barva těla, barva očí, pohlaví). • Rozlište čisté linie od kříženců na základě jejich genotypů a fenotypů.
Téma 4: Buněčné kultury a jejich kultivace Sylabus – Buněčná kultura, buněčná linie, počítání buněk
Výsledky učení Zadání pro znalosti: • Vysvětlete termíny buněčná linie a buněčná kultura a u každé uveďte příklad. • Vysvětlete termín kultivace buněk a vyjmenujte podmínky, které jsou nutné pro kultivace buněk v in vitro podmínkách. • Vysvětlete termín buněčná konfluence. • Popište proces kultivace buněk. • Pojmenujte zařízení, které se používá pro počítání buněk a vysvětlete jeho princip. • Vysvětlete termín viabilita buněk.
Zadání pro dovednosti: • Připravte preparát pro počítání buněk. • Pomocí zařízení pro určení počtu buněk spočítejte jejich koncentraci a určete viabilitu buněčné kultury/linie.
Téma 5: Trepka velká a dynamika buněčného stresu Sylabus – popis a charakteristika Trepky velké, stresové faktory, fotodynamická terapie
Výsledky učení Zadání pro znalosti: • Vysvětlete základní typy stresových faktorů (fyzikální, chemické, biologické) a jejich účinky na jednobuněčné organismy, zejména na trepku velkou. • Popište rozdíl mezi specifickými a nespecifickými stresovými faktory a jejich vliv na buňku. • Identifikujte základní organely Paramecium caudatum a jejich funkce v buňce (makronukleus, mikronukleus, kontraktilní vakuola, potravní vakuola, pelikulární struktura s brvami). • Popište mechanismus pohybu trepky a její způsob přijímání a zpracování potravy. • Definujte fotodynamický efekt a jeho aplikaci ve fotodynamické terapii, včetně role fotosenzibilizátorů a jejich účinku na nádorové buňky.
Zadání pro dovednosti: • Pozorujte reakce trepky na přítomnost glukózy a methylenové modři a popište proces chemotaxe, včetně rozdílu mezi pozitivní a negativní chemotaxí. • Aplikujte metodu intravitálního barvení pomocí neutrální červeně, sledujte barvení organel a posuďte účinky barviva na životaschopnost trepky. • Určete lokalizaci barviva v buňce a vysvětlete změny barevného odstínu v závislosti na chemickém prostředí uvnitř organel.
Téma 6: Buněčný cyklus a jeho fáze Sylabus – buněčný cyklus, mitóza, mikroskopování trvalých preparátů mitózy v rostlinných i živočišných buňkách
Výsledky učení Zadání pro znalosti: • Vyjmenujte a charakterizujte jednotlivé fáze buněčného cyklu. • Popište, z jakých fází se skládá M-fáze. • Definujte, které děje v jednotlivých mitotických fázích probíhají. • Definujte, které z těch teoreticky zmíněných jevů jsme schopni pozorovat v mikroskopu. • Diskutujte, jak poznat rozdíl mezi cytokinezí a telofází u rostlinné buňky. • Diskutujte, jak poznat rozdíl mezi cytokinezí a telofází u živočišné buňky. • Popište rozdíly mezi cytokinezí u živočišné a rostlinné buňky.
Zadání pro dovednosti: • Navrhněte, ve kterých částech preparátu (roztlakový kořínek cibule, řež kořínkem cibule a řez krysích jater) se nachází nejvíce buněk ve fázi mitózy a doporučte způsob hledání v mikroskopu pro každý ze tří typů preparátů. • V každém ze tří mikroskopických preparátů najděte buňku ve fázi mitózy a zakreslete ji. • Proveď výpočet konečného zvětšení pozorované buňky. • Pozorujte, zakreslete a popište rozdíly mezi preparáty živočišných a rostlinných buněk v cytokinezi. • Pozorujte, zakreslete a popište rozdíly mezi buňkami v interfázi a M-fázi. Poslední úprava: Svobodová Zuzana, Mgr., Ph.D. (01.09.2025)
|