|
|
|
||
Cílem přednášky je seznámit posluchače se základními principy energetického zabezpečování fyziologické funkční aktivity v různých eukaryotických buňkách a se základními mechanizmy regulujícími intenzitu procesu přeměny energie za fyziologických a patologických stavů. Poslední úprava: Mráček Tomáš, RNDr., Ph.D. (25.03.2015)
|
|
||
Alberts a spol. Základy buněčné biologie, Kap.3 Energie, katalýza a biosyntéza. (Espero Publishing, Ústí nad Labem.) Poslední úprava: Mráček Tomáš, RNDr., Ph.D. (14.10.2014)
|
|
||
Zkouška se skládá z písemné a ústní části. Poslední úprava: Horníková Daniela, RNDr., Ph.D. (06.04.2012)
|
|
||
1. Úvod do bioenergetiky (Drahota) Bioenergetika jako součást buněčného metabolismu, která zabezpečuje energii pro endergonické reakce podílející se na syntetických i degradačních procesech a na různých funkčních aktivitách různých buněčných populací nezbytných pro zajišťování existence organismů jako celku. Stručný přehled vědeckých osobnosti, které se podílely na objasnění principů přeměny energie v eukaryotických buňkách.
2. Regulace energetického metabolismu na úrovni celého organizmu I (Flachs) Energetické senzory buňky (AMPK, SIRT) a regulace energetického metabolismu buňky. Coriho cyklus. Energetická bilance organizmu. Neurální a humorální řízení intenzity energetického metabolismu organismu.
3. Regulace energetického metabolismu na úrovni celého organizmu II (Flachs) Cirkadiální cyklus toku a distribuce energie v organizmu. Metabolická teorie života. Obezita a metabolický syndrom. Hodnocení celotělových parametrů a dlouhodobé monitorování metabolických funkcí. Metody: Nepřímá kalorimetrie, pozitronová emisní tomografie (CT/PET skener).
4. Regulační mechanizmy zabezpečující energetickou homeostázu I (Žurmanová) Hydrolýza ATP, význam Gibbsovy volné energie. Poměr ATP/ADP jako senzor. Udržování poměru ATP/ADP - CK systém, adenylát kináza, AMP deamináza. Signalizace adenosinu (adenosinové receptory a signální dráhy HIF a p53). Regulace glykolýzy a Krebsova cyklu vápníkem při aktivaci kontrakce.
5. Regulační mechanizmy zabezpečující energetickou homeostázu II (Žurmanová) Hexokináza a její role v regulaci apoptózy a MPTP. Fosfagenové systémy v živočišné říši. Srdce v hypoxii (HIF regulace, Na přetížení, Ca přetížení). Laktátový metabolizmus - mozek - srdce - sval
6. Mitochondriální energetika a její tkáňová specifita (Mráček) Mitochondrie a jejich úloha v buňce. Specificita struktury a enzymového vybavení mitochondrií v různých tkáních - zajištění specifických fyziologických funkcí. Hnědá tuková tkáň - příklad specializace mitochondriálního metabolizmu. Lipidy a jejich metabolizmus, důležitost pro mitochondrie hnědého tuku.
7. Molekulární mechanismy biotransformace energie v mitochondriích (Pecina) Mitochondriální produkce ATP, chemiosmotická teorie. Enzymové komplexy mitochondriálního dýchacího řetězce, transport elektronů (redoxní centra). Strukturně/funkční interakce mezi jednotlivými komplexy dýchacího řetězce. Metody: měření spotřeby kyslíku, měření mitochondriálního membránového potenciálu.
8. Mechanismy regulace OXPHOS (Pecina) Cytochrom c oxidáza jako model regulace oxidační fosforylace: Struktura a podjednotkové složení - srovnání prokaryotické a eukaryotické formy enzymu; Tkáňově specifické podjednotky: jaterní vs. srdeční isoformy podjednotek 6a, 7a a 8 savčí COX. Regulace parciálním tlakem kyslíku - HIF signalizace, COX 4 izoformy v regulaci afinity enzymu ke kyslíku. Postranslační regulace - tyrosinové fosforylace, Ser/Thr fosforylace řízené intramitochondriální cAMP/PKA drahou, acetylace. Metody: metabolické značení, pulse-chase experimenty
9. Biogeneze OXPHOS (Mráček) Biogeneze enzymových komplexů, úloha pomocných proteinů (asemblační faktory). Organizace OXPHOS do vyšších celků - superkomplexy. Dynamika uspořádání OXPHOS, vliv struktury na regulaci energetického metabolismu. Metody: nativní elektroforetické techniky
10. Životní cyklus mitochondrií (Mráček) Mitochondriální retikulum - statická struktura (tomografie) vs. dynamika. Proteiny zajišťující fůzi a dělení mitoretikula. Import proteinů do mitochondrií, degradace proteázami, mitochondriální UPR. Degradace celých mitochondrií - mitofagie. Metody: mikroskopie, fluorescenční próby
11. Vrozené metabolické poruchy energetického metabolismu buněk (Mráček) Poruchy OXPHOS - kódované mtDNA (s maternální dědičností), jaderně kódované. Sekundární defekty OXPHOS - poruchy mitochondriálního translačního aparátu, defekty v importních drahách, mutace proteinů zajišťujících mitochondriální dynamiku. Mitochondriální genetika - maternální dědičnost, heteroplazmie, segregace, bottleneck efekt. Metody: diagnostické metody, exomové sekvenování
12. Mitochondriální tvorba ROS (Mráček) Produkce ROS v OXPHOS a na jiných proteinech s mitochondriální lokalizací. Patologická vs. signální úloha ROS, regulace intenzity ROS produkce. Detoxifikace ROS (SOD, glutation, thioredoxiny…). Úloha ROS v procesu stárnutí organizmu. Metody: fluorescenční metody, EPR detekce, biomarkery oxidativního poškození Poslední úprava: Mráček Tomáš, RNDr., Ph.D. (14.10.2014)
|