|
|
|
||
|
Přednáška je určena studentům, kteří chtějí získat ucelený přehled o experimentálních metodách využívaných v neurovědním výzkumu a porozumět jejich principům. Součástí kurzu je praktikum zaměřené na praktické seznámení se s vybranými typy behaviorálních experimentů a imunohistochemických technik. Doporučená je zejména studentům specializace neurobiologie.
Poslední úprava: Horníková Daniela, RNDr., Ph.D. (28.03.2019)
|
|
||
|
Carter M, Shieh J, 2010: Guide to Research Techniques in Neuroscience. Elsevier Academic Press. Poslední úprava: Horníková Daniela, RNDr., Ph.D. (14.04.2011)
|
|
||
|
Zápočet se uděluje na základě 100% docházky a předložení protokolů. Předmět je ukončen ústní zkouškou. Poslední úprava: Horníková Daniela, RNDr., Ph.D. (10.02.2025)
|
|
||
|
1. Zobrazovací techniky Strukturní a funkční zobrazovací techniky, např. angiografie, počítačová tomografie (CT), magnetická rezonance (MRI a fMRI), positronová emisní tomografie (PET), SPECT, EEG, MEG. 2. Metody studia chování živočichů v neurovědách Volba experimentálního modelu, nejčastěji používané behaviorální testy u hlodavců (testy prostorové paměti, neprostorové paměťové testy, testy senzorické, nocicepční, motorické, testy afektivních stavů), přehled behaviorálních testů používaných u dalších organismů. 3. Stereotaktické techniky Stereotaktické operace u hlodavců a primátů, typy implantátů a jejich použití (mimo elektrofyziologických), mikrodialýza in vivo, elektrostimulační techniky, experimentální léze a výběr metody jejich navození, farmakologické a genetické metody. 4. Elektrofyziologie Nahrávání elektrofyziologické aktivity in vivo a in vitro, extracelulární a intracelulární měření, nahrávání elektrofyziologických dat metodou terčíkového zámku, implantáty pro 5. Mikroskopické techniky Základy mikroskopické techniky, světelná, fluorescenční (epifluorescenční, dvoufotonová, konfokální, TIRF) a elektronová (transmisní, skenovací) mikroskopie, základy zpracování mikroskopických dat. 6. Histologické a zobrazovací techniky Základní techniky přípravy histologických preparátů, barvení, techniky zobrazování genové exprese (in situ hybridizace, imunohistochemie, enzymová histochemie, reportérové geny), techniky zobrazování neurálních spojů (anterográdní a retrográdní značení, transsynaptické značení), markery aktivity, optické zobrazovací techniky. 7. Molekulárně genetické techniky Metody identifikace genů a proteinů, molekulární klonování a techniky rekombinantní DNA, techniky vkládání genů, příprava a využití transgenních organismů, techniky manipulace endogenních genů. 8. Tkáňové kultury Technické vybavení a media pro tkáňové kultury, imortalizované buněčné linie, primární kultury, kultury kmenových buněk, techniky manipulace tkáňových kultur. 9. Biochemické techniky Základní metody studia proteinů, stanovení exprese proteinů, protein-proteinové interakce, interakce protein-DNA, posttranslační modifikace.
Praktická část - demonstrace vybraných behaviorálních testů a monitorování chování labolatorních potkanů (otevřená aréna, vyvýšené kruhové bludiště) a vyhodnocení dat pomocí pomocí příslušného softwarového vybavení; příprava řezů mozkové tkáně a jejich zpracování pro imunohistochemické analýzy; součástí praktika je vyřešení úlohy spočívající ve výběru vhodných metodických přístupů pro řešení konkrétního neurobiologického problému. Poslední úprava: Horníková Daniela, RNDr., Ph.D. (24.03.2019)
|
|
||
|
Po absolvování předmětu student - popíše různé biochemické a analytické metody (stanovení proteinů, kolonová chromatografie, tenkovrstevná chromatografie, imunoprecipitace, gelová elektroforéza, Western blot, ELISA, RIA, FRET, hmotnostní spektrometrie), jejich principy a použití v neurobiologickém výzkumu - charakterizuje typy a využitelnost buněčných a tkáňových kultur ve výzkumu nervového systému - uvede příklady (EEG, sonografie, radiografie, angiografie, magnetoencefalografie, výpočetní tomografie, magnetická rezonance, pozitronová emisní tomografie) a principy zobrazovacích technik používaných v diagnostice neurologických poruch a výzkumu CNS - charakterizuje principy a způsoby využití molekulárně genetických technik (klonování DNA, PCR, transgenní manipulace, RNA interference, CRISPR/Cas9) v neurobiologickém výzkumu - charakterizuje principy světelné, fluorescenční a elektronové mikroskopie a uvede příklady jejich využití v neurobiologickém výzkumu - popíše principy a využití behaviorálních technik v neurovědách, vysvětlí kvalitativní kritéria pro hodnocení behaviorálních testů (validita, spolehlivost, opakovatelnost), vysvětlí smysl koncepce tří „R“ - definuje základní pojmy stereotaxie a popíše typy mozkových implantátů a způsoby jejich zavádění
Praktická část - aktivně a kriticky pracuje s odbornou literaturou - popíše teoretické principy uplatňované při provádění experimentů v rámci vědecké práci - navrhne vhodný postup s využitím různých přístupů a metod pro řešení zadaného vědeckého problému - objektivně posoudí výhody a nevýhody různých metodických přístupů pro získání adekvátních dat - diskutuje alternativní postupy a jejich praktickou realizovatelnost - zpracuje podrobný laboratorní pracovní protokol o způsobu řešení zadané úlohy - popíše manipulační techniky používané při studiu chování laboratorních zvířat Poslední úprava: Novotný Jiří, doc. RNDr., DSc. (26.01.2026)
|