PředmětyPředměty(verze: 964)
Předmět, akademický rok 2024/2025
   Přihlásit přes CAS
Buňky a tkáně in vitro - MB150P23
Anglický název: Cells and Tissues in vitro
Český název: Buňky a tkáně in vitro
Zajišťuje: Katedra buněčné biologie (31-151)
Fakulta: Přírodovědecká fakulta
Platnost: od 2022
Semestr: zimní
E-Kredity: 3
Způsob provedení zkoušky: zimní s.:
Rozsah, examinace: zimní s.:1/2, Z+Zk [HT]
Počet míst: 80
Minimální obsazenost: neomezen
4EU+: ne
Virtuální mobilita / počet míst pro virtuální mobilitu: ne
Stav předmětu: vyučován
Jazyk výuky: čeština
Vysvětlení: Praktická cvičení ZÁPIS - MOODLE - turnusy po 10 studentech.
Další informace: https://teams.microsoft.com/l/team/19%3a5967351dce504d53b6b018271040e571%40thread.tacv2/conversations?groupId=df609ae4-b9c2-4228-811d-311a83d2e1f0&tenantId=bece27e5-d902-4c70-88c0-661be1b17dd1
Poznámka: povolen pro zápis po webu
Garant: RNDr. Tereza Tlapáková, Ph.D.
Vyučující: RNDr. Tereza Tlapáková, Ph.D.
Anotace -
Přednáškový kurz (1/3) a cvičení (2/3) jsou zaměřeny na získání znalostí pro práci s buněčnými a tkáňovými kulturami živočichů. Důraz je kladen, jak na odborné znalosti, tak na technické vybavení a bezpečnost. V první části kurzu je probíráno vybavení laboratoře, materiály a jejich vlastnosti, voda, sterilizace, média a suplementy pro živočišné kultury. Druhá část kurzu je zaměřena na založení a udržování kultury včetně disagregace buněk. Dále pak na frakcionaci buněk, pozorování a měření buněk, stanovení proteinů a DNA, histochemické a karyologické techniky. Součástí kurzu je i transfekce buněk, imortalizace kultur a nádorová transformace. Praktická cvičení jsou turnusová.


Poslední úprava: Tlapáková Tereza, RNDr., Ph.D. (07.10.2020)
Literatura

Freshney, R. Ian: Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique and Specialized Applications, 7th Edition. Wiley-Blackwell, 2016 (ISBN: 978-1-118-87365-6).

 

Poslední úprava: Šebková Nataša, RNDr., Ph.D. (21.02.2018)
Požadavky ke zkoušce -

Zápočet: 100% účast na praktických cvičení; zápočet je podmínkou pro složení zkoušky.
Zkouška: ústní, cca 30 min, studentům je umožněna písemná příprava (cca 10 min ).

Požadavky ke zkoušce v době protiepidemických opatření zůstávají (zatím) stejné.

Poslední úprava: Tlapáková Tereza, RNDr., Ph.D. (07.10.2020)
Sylabus -

Přednáška :

1. Vybavení: sterilní místnost, box, laminární box, termostat, CO2 termostat.

2. Materiály a jejich vlastnosti: sklo, polyethylen, polypropylen, polystyren, PVC, teflon, fenolformaldehyd, guma, silikon, kovy, buničina, papír.

3. Voda: znečištěniny, destilace, reversní osmóza, deionizace, aktivní uhlí, sterilizace.

4. Kontaminace.

5. Aseptická technika.

6. Mytí a úprava povrchu.

7. Sterilizace: suché a vlhké teplo, ozáření, filtrace, plyny a páry, desinfekce povrchů.

8. Základní podmínky života: osmolarita, pH, pufrování, CO2, teplota.

9. Média a suplementy: balancované solné směsi, média, glutamin, antibiotika, bikarbonát, sérum, bezsérová média.

10. Typy kultur: tkáňové, buněčné, kmenové buňky, linie, růst a evoluce kultury.

11. Primární kultury: zdroje tkání, fragmenty a suspense.

12. Udržování kultury: subkultura, výměna média, disagregace buněk, klonování, zamražování.

13. Frakcionace a separace buněk.

14. Pozorování a měření: hemocytometr, cell counter, kalibrace, histochemie, pozorování a měření NK (DAPI, Hoechst), viabilita a cytotoxicita (dye exclusion, tetrazoliové soli). Stanovení proteinů (Lowry, Bradfordová, UV), stanovení DNA (DAPI, EtBr), značení živých buněk.

15. Karyologie: příprava roztěrů, barvení, pruhování chromozómů, hybridizace in situ.

16. Transformace buněk: nádorová transformace, kontaktní inhibice, imortalizace kultur, buněčná fúze, transfekce buněk (positivní a negativní selekce, GFP, lipofekce, elektroporace), COS buňky.

Praktická cvičení :

1. Příprava primární kultury, příprava média.

2. Udržování kultury: pasážování, zamražování, rozmražování.

3. Klonování v agaru.

4. Karyotyp myši.

5. Kultivace a fixace buněk na skle, imunofluorescenční barvení cytoskeletu buněk.





Předmět je vyučován za podpory projektu Zvýšení kvality vzdělávání na UK a jeho relevance pro potřeby trhu práce, reg.č. CZ.02.2.69/0.0/0.0/16_015/0002362.
Poslední úprava: Rubešová Jana, RNDr., Ph.D. (05.09.2019)
 
Univerzita Karlova | Informační systém UK