Parazitologické laboratorní techniky - MB160C34

• Anglický název: Parasitological Laboratory Techniques
• Zajišťuje: Katedra parazitologie (31-161)
• Fakulta: Přírodovědecká fakulta
• Platnost: od 2011 do 2016
• Semestr: zimní
• E-Kredity: 4
• Způsob provedení zkoušky: zimní s.:
• Rozsah, examinace: zimní s.:0/4, Z [HT]
• Počet míst: 14
• Minimální obsazenost: neomezen
• 4EU+: ne
• Virtuální mobilita / počet míst pro virtuální mobilitu: ne
• Stav předmětu: vyučován
• Jazyk výuky: čeština
• Poznámka: povolen pro zápis po webu
• Garant: doc. RNDr. Ivan Hrdý, Ph.D.
• Vyučující: doc. RNDr. Ivan Hrdý, Ph.D.; RNDr. Tereza Leštinová, Ph.D.; RNDr. Tatiana Spitzová, Ph.D.

Anotace

čeština

Poslední úprava: doc. RNDr. Ivan Hrdý, Ph.D. (14.03.2019)

Základní kultivační techniky, axenizace a klonování prvoků; příprava nativních a trvalých preparátů pro diagnostiku a cytologii, ELISA a PCR v diagnostice, immunofluorescence

angličtina

Poslední úprava: doc. RNDr. Ivan Hrdý, Ph.D. (21.03.2019)

Basic parasitological laboratory methods including staining procedures (staining of blood smears according Giemsa-Romanowski, Wallace, Pappenheim, Dade Diff-Quik; staining of wet smears using Heidenhain's iron hematoxylin), cultivation techniques (maintenance of axenic culture, cell counting and cloning, growth experiments) immunologic methods (ELISA, indirect immunofluorescence) and identification of parasite in stool samples

Literatura

Poslední úprava: RNDr. Helena Kulíková (08.10.2014)

studenti dostávají (každý přítomný) na každém praktiku xeroxované návody k úlohám

http://web.natur.cuni.cz/parasitology/vyuka/para_lab_techniky_Hrdy/Parazitol_lab_tech_Hrdy.htm

Požadavky ke zkoušce

Poslední úprava: doc. RNDr. Ivan Hrdý, Ph.D. (25.10.2019)

aktivní účast na praktiku, maximálně 1 omluvená absence

Sylabus

Poslední úprava: doc. RNDr. Ivan Hrdý, Ph.D. (25.10.2019)

Technika suchých nátěrů, manipulace s laboratorní myší

• krevní roztěr, tlustá kapka

• nátěry z kultur prvoků (trichomonády)

• barvení suchých nátěrů metodou Giemsy-Romanowského

• rychlé barvení Dade Diff-Quik

• manipulace s laboratorní myší, pasážování Trypanosoma brucei, Plasmodium berghei

• zmražovací techniky, kryoprezervace prvoků

Fluorescenční barvící metody

• vitální barvení acridinovou oranží

• jaderné barvení Hoechstem nebo DAPI

• fluorescenční sondy citlivé k pH

• značení FITC

• imunofluorescence

Základní kultivační technika

• příprava zásobních roztoků antibiotik

• izolace axenické kultury Tritrichomonas foetus pomocí migrační rourky

• pasážování axenických kultur, zkouška sterility

Klonování

• izolace klonů zřeďovací metodou (Tetrahymena pyriformis)

• izolace klonů metodou mezního ředění (Trichomonas vaginalis)

• izolace klonů bičíkovců z čeledi Trypanosomatidae na agarových plotnách

Kvantitativní práce s prvoky

• práce s Burkerovou počítací komůrkou

• výpočet koncentrace buněk

• kvantitativní nasazení růstového pokusu

• vyhodnocení růstového pokusu

ELISA

• využití v diagnostice

• test na přítomnost protilátek proti Toxoplasma gondii

PCR

• využití v diagnostice

• test na přítomnost lidských patogenů/komensálů

• detekce DNA na gelech

• elektroforetické metody

Příprava a izolace rekombinantního proteinu

• práce s bakteriální kulturou, podmínky indukce a exprese cizorodého proteinu

• izolace proteinu v nativní a denaturované formě afinitní chromatografií

• analýza proteinového vzorku elektroforézou

• elektroforetické metody