Separation Methods - NBCM011

• Title: Separační metody
• Guaranteed by: Institute of Physics of Charles University (32-FUUK)
• Faculty: Faculty of Mathematics and Physics
• Actual: from 2023
• Semester: summer
• E-Credits: 3
• Hours per week, examination: summer s.:0/2, C [HT]
• Capacity: unlimited
• Min. number of students: unlimited
• 4EU+: no
• Virtual mobility / capacity: no
• State of the course: taught
• Language: Czech
• Teaching methods: full-time
• Teaching methods: full-time
• Guarantor: RNDr. Kateřina Hofbauerová, Ph.D.; RNDr. Jana Zachová, CSc.
• Classification: Physics > Biophysics and Chemical Physics
• Pre-requisite : NBCM010

Annotation

English

Last update: G_F (06.06.2001)

Methods for preparation of biologically important material - extraction, centrifugation, membrane separations, chromatography, electrophoresis, crystallization.

Czech

Last update: ()

Metody přípravy vzorků biologicky důležitých látek -- extrakce, centrifugace, dělení látek membránou, chromatografie, elektroforéza, krystalizace.

Course completion requirements

English

Last update: prof. RNDr. Marek Procházka, Ph.D. (14.05.2020)

Credit is awarded on the basis of participation and final test. 70% participation is required. The test takes place in the credit week and corresponds to the syllabus given in the first lesson. If the test fails, the test can be repeated.

Czech

Last update: prof. RNDr. Marek Procházka, Ph.D. (14.05.2020)

Zápočet se uděluje na základě účasti a závěrečného testu. Je vyžadována 70% účast. Test probíhá v zápočtovém týdnu a odpovídá sylabu uvedenému v první hodině. V případě neúspěšného vypracování testu je možno test opakovat.

Literature

Last update: T_FUUK (17.05.2011)

J.Zachová: Dělicí metody v Experimentální metody biofyziky, ed. V.Prosser, Academia, Praha 1989

Syllabus

English

Last update: prof. RNDr. Marek Procházka, Ph.D. (14.05.2020)

Importance of separation methods. Classification and selection.

Release from tissue.

Extraction. Liquid extraction. Solid phase extraction. Use.

Precipitation. Salting. Precipitation with a water-miscible organic liquid. Precipitation by change

pH. Precipitation by formation of insoluble compounds.

Centrifugation. Methods. Types of centrifuges. Use. Analytical ultracentrifugation.

Division of substances by membrane. Membrane materials. Dialysis. Filtration. Reverse osmosis.

Chromatography. Introduction. general principles and classification. Detection. Choice of stationary phase.

Choice of mobile phase. Adsorption chromatography: Principle. Methodology. Classic columnar

adsorption chromatography. Thin layer chromatography. Distributive

chromatography: Principle. Methodology. Drop countercurrent chromatography. Paper

chromatography. Chromatography on ion exchangers: Ion exchangers (ionexy). Methodology.

Use. Chromatofocusing. Gel permeation chromatography: Principle. Use.

Affinity chromatography. Principle. Choice of affinity. Use. Highly efficient liquid

chromatography: Methodology. Application: SPE

Electrophoresis. Factors influencing ion movement. Classification of electrophoretic methods.

Free electrophoresis: Electrophoresis with a moving interface (Tiseliova). Continuous

zone electrophoresis. Electrophoresis on supports: Electrophoresis in gels.

Isotachophoresis. Isoelectric focusing. Capillary electrophoresis. Combined

electrophoretic methods: Electrochromatography. Immunoelectrophoresis. Importance

electrophoresis for protein separation.

Crystallization. Crystallization from solution. Methods of growing single crystals biologically

important substances.

Czech

Last update: T_FUUK (17.05.2011)

Význam separačních metod. Klasifikace a výběr.

Uvolnění z tkáně.

Extrakce. Extrakce z kapaliny. Extrakce z pevné fáze. Použití.

Srážení. Vysolování. Srážení organickou kapalinou mísitelnou s vodou. Srážení změnou

pH. Srážení tvorbou nerozpustných sloučenin.

Centrifugace. Metody. Typy odstředivek. Použití. Analytická ultracentrifugace.

Dělení látek membránou. Materiály membrán. Dialýza. Filtrace. Reverzní osmóza.

Chromatografie. Úvod. obecné principy a klasifikace. Detekce. Volba stacionární fáze.

Volba mobilní fáze. Adsorpční chromatografie: Princip. Metodika. Klasická sloupcová

adsorpční chromatografie. Chromatografie na tenké vrstvě. Rozdělovací

chromatografie: Princip. Metodika. Kapková protiproudá chromatografie. Papírová

chromatografie. Chromatografie na měničích iontů: Měniče iontů (ionexy). Metodika.

Použití. Chromatofokusace. Gelová (vylučovací) chromatografie: Princip. Použití.

Afinitní chromatografie. Princip. Volba afinantu. Použití. Vysokoúčinná kapalinová

chromatografie: Metodika. Použití: SPE

Elektroforéza. Faktory ovlivňující pohyb iontů. Klasifikace elektroforetických metod.

Volná elektroforéza: Elektroforéza s pohyblivým rozhraním (Tiseliova). Kontinuální

zónová elektroforéza. Elektroforéza na nosičích: Elektroforéza v gelech.

Izotachoforéza. Izoelektrická fokusace. Kapilární elektroforéza. Kombinované

elektroforetické metody: Elektrochromatografie. Imunoelektroforéza. Význam

elektroforézy pro dělení bílkovin.

Krystalizace. Krystalizace z roztoku. Metody pěstování monokrystalů biologicky

významných látek.