SubjectsSubjects(version: 970)
Course, academic year 2024/2025
   Login via CAS
Cytometry - MB151P80
Title: Cytometrie
Czech title: Cytometrie
Guaranteed by: Department of Cell Biology (31-151)
Faculty: Faculty of Science
Actual: from 2024
Semester: winter
E-Credits: 4
Examination process: winter s.:
Hours per week, examination: winter s.:2/1, C+Ex [HT]
Capacity: 21
Min. number of students: unlimited
4EU+: no
Virtual mobility / capacity: no
State of the course: taught
Language: Czech
Explanation: Předmět je neslučitelný s anglickou paralelkou (letní semestr).
Note: enabled for web enrollment
Guarantor: MVDr. Jozef Janda, Ph.D.
Teacher(s): Mgr. Ondřej Honc
MVDr. Jozef Janda, Ph.D.
Incompatibility : MB151P80E
Is incompatible with: MB151P80E
Annotation - Czech
Student bude provedený základní klasifikací cytometrických metod s jejich historickým kontextem. Technologické výhody a nevýhody jednotlivých vývojových směrů cytometrie budou dokumentované na aplikacích ve více oborech: imunologii, reprodukční biologii, botanice, mikrobiologii, protistologii, hydrobiologii, molekulární biologii, genetice a biomedicíně obecně.

Součástí je i práce s daty a praktická cvičení ve 4 tematických celcích:
- analýza dat (základní)
- návrh experimentu
- příprava vzorku a měření multiparametrických dat
- reportování a analýza dat (pokročilá)

Aplikační využití cytometrie zahrnuje široké vědecké postupy a experimenty: analýzu a třídění různých velikostí částic od submikronových (chromozomů, bakterií, organel a vesiklů) přes buňky do velikosti stovek mikronů, ale i celých organismů až do velikosti 1mm. Analýza se neomezuje pouze na statické jednoparametrické "screeningové" experimenty, ale hlavní síla cytometrie je v multiparametrické analýze heterogenních vzorků a jejich funkčních vlastností. S objevem nových fluorochromů, včetně různých variant fluorescenčních proteinů, dnes můžeme studovat funkční projevy buněk až na úrovni protein-protein interakcí. Proto se stala cytometrie jedním ze stavebních bloků systémové biologie a umožňuje nám měřit desítky parametrů na miliónech buněk současně.

Technologie cytometrie i vlastní cytometrická data jsou velmi komplexní, plně standardizovaná a umožňují nám použití robustních statistických metod pro jejich analýzu. Součástí předmětu je proto praktická ukázka a detailní procvičení analýzy dat. Důraz je kladený hlavně na klasickou fluorescenční průtokovou cytometrii. Další varianty cytometrie, včetně hmotnostní a obrazové, budou probírané, ale nebudou předmětem vlastních praktických cvičení.

Absolventi budou mít po složení zápočtu a zkoušky:
- znalost principů jednotlivých směrů cytometrie
- znalost o funkci přístrojů a souvisejícím využití vhodných fluorochromů a prób
- znalost o stávajících aplikacích průtokové cytometrie v širokém spektru vědních oborů
- schopnost posoudit vhodnost zvolené metody při řešení konkrétního problému
- schopnost analyzovat a interpretovat výsledky získané průtokovou cytometrií
- schopnost kriticky hodnotit kvalitu cytometrických dat ve vědeckých publikacích

Last update: Janda Jozef, MVDr., Ph.D. (23.09.2024)
Literature - Czech

Pro začátečníky:
GIVAN, Alice. L.: Flow Cytometry: First Principles, Wiley-Liss, New York, 2001, ISBN-13: 978-0471382249, ke stažení https://media.beckman.com/-/media/pdf-assets/ebooks/flow-cytometers-ebook-flow-cytometry-first-principles.pdf 
ORMEROD, Michael. G.: Flow Cytometry - A Basic Introduction, http://flowbook.denovosoftware.com/

Pro pokročilé:
SHAPIRO, Howard. M.: Practical Flow Cytometry, 4th Edition. John Wiley and Sons, Inc., New York, 2003, ISBN-13: 978-0471411253, dostupné: https://media.beckman.com/-/media/pdf-assets/ebooks/flow-cytometers-ebook-practical-flow-cytometry.pdf

Metodické učebnice a návody:
ROBINSON, J. Paul. et al.: Current Protocols in Cytometry, John Wiley & Sons, New York, 2003, ISBN-13: 978-0471142959

Cytometrie v kostce: Youtube kanál v češtině https://www.youtube.com/channel/UC04XHayL2NcUVEjzh11odzA?sub_confirmation=1

Last update: Janda Jozef, MVDr., Ph.D. (23.09.2024)
Requirements to the exam - Czech

Výuka probíhá prezenčně. 

Zápočet se skládá z:
Aktivní účast na výuce (min 80%), odevzdaný návrh experimenu (vícebarevného panelu), odevzdaný report z analýzy dat

Zkouška: Studenti mají na výběr ze dvou variant hodnocení studia, přičemž přechod z Varianty 1 na Variantu 2 je možný:

Varianta 1 - Průběžné hodnocení:

Kontrola studia bude probíhat průběžně během semestru, a to formou krátkých dílčích testů zadávaných ke každé lekci. Jejich vypracování bude možné vždy v týdnu následujícím po dané lekci. Studenti budou moci k vypracování dílčího testu použít všechny dostupné materiály. Pro vypracování dílčího testu bude k dispozici pouze jeden pokus ve stanoveném časovém limitu. Na závěr semestru bude zařazen 1 test průřezový (9.1.2025). Výsledné hodnocení bude studentovi zapsáno pouze za předpokladu, že se v SIS přihlásí k předtermínu zkoušky, který bude pro forma vypsán na 9. ledna 2025. Pokud se student k tomuto termínu v SIS nepřihlásí, nebude mu výsledné hodnocení na základě průběžného hodnocení do SIS zapsáno.

Varianta 2 - Závěrečná zkouška:

V souladu se SZŘ budou během zkouškového období vypsány tři termíny zkoušky. Zkouška proběhne formou písemného testu, při němž studenti nesmí nahlížet do žádných materiálů. Test bude zahrnovat otázky typu „multiple-answer“, kdy správně či chybně může být nula až všechny možnosti. Část otázek bude zaměřená na krátké slovní odpovědi. K úspěšnému složení zkoušky je nutné získat ve zkouškovém testu minimálně 60 % bodů. Výsledné hodnocení bude stanoveno následovně: výborně = 90-100 %, velmi dobře = 71-89 %, dobře = 60-70 %, neprospěl = 0-59 %. Do výsledného hodnocení se NEZAPOČÍTÁVAJÍ body z dílčích testů a z průřezového testu.

V případě nerozhodného výsledku, pochybností nebo při odůvodněné žádosti bude následovat ústní část zkoušky.

Last update: Janda Jozef, MVDr., Ph.D. (23.09.2024)
Syllabus - Czech

Témata:

1. Jak funguje cytometr - fluidika, optika, elektronika

2. Fluorescence a kompenzace přesvitů, design vícebarevného panelu

3. Příprava vzorku, nastavení cytometru

4. Analýza DNA - obsah DNA, viabilita, buněcný cyklus, proliferace

5. Imunofenotypizace - studium Ag-specifických T lymfocytů

6. Buněčná smrt a apoptóza

7. Cytometrie v klinické diagnostice

8. Další zajímavé aplikace

9. Buněčný sorting

10. Obrazová cytometrie

11.-13. Projekty, prezentace, procvičování

Základní struktura každé lekce: Přivítání - teorie  - design experimentu - analýza dat - možnosti uplatnění v reálném životě - shrnutí.

Last update: Janda Jozef, MVDr., Ph.D. (01.10.2024)
 
Charles University | Information system of Charles University | http://www.cuni.cz/UKEN-329.html