Témata prací (Výběr práce)Témata prací (Výběr práce)(verze: 379)
Detail práce
   Přihlásit přes CAS
Exprese a purifikace mutantů cytochromu b5 s nepřirozenými aminokyselinami
Název práce v češtině: Exprese a purifikace mutantů cytochromu b5 s nepřirozenými aminokyselinami
Název v anglickém jazyce: Expression and Purification of Cytochrome b5 Mutants with Non-canonical Amino Acids
Klíčová slova: nepřirozené aminokyseliny, exprese proteinů, purifikace proteinů, cytochrom b5, hmotnostní spektrometrie
Klíčová slova anglicky: Non-canonical Amino Acids, Protein Expression, Protein Purification, Cytochrome b5, Mass Spectrometry
Akademický rok vypsání: 2024/2025
Typ práce: diplomová práce
Jazyk práce: čeština
Ústav: Katedra biochemie (31-250)
Vedoucí / školitel: RNDr. Tomáš Ječmen, Ph.D.
Řešitel:
Konzultanti: RNDr. Věra Černá, Ph.D.
Seznam odborné literatury
Jecmen T. et al.: Photo-Methionine, Azidohomoalanine and Homopropargylglycine Are Incorporated into Newly Synthesized Proteins at Different Rates and Differentially Affect the Growth and Protein Expression Levels of Auxotrophic and Prototrophic E. coli in Minimal Medium (Int J Mol Sci, 2023, Jul 22;24(14):11779, doi: 10.3390/ijms241411779)
Jecmen T. et al.: Photo-initiated crosslinking extends mapping of the protein-protein interface to membrane-embedded portions of cytochromes P450 2B4 and b5 (Methods, 2015, Nov 1;89:128-37, doi: 10.1016/j.ymeth.2015.07.015)
Předběžná náplň práce
V práci budou exprimovány vybrané mutantní cytochromy b5 v auxotrofních bakteriích se zablokovanou drahou syntézy methioninu, které umožňují vnesení nepřirozeného aminokyselinového analogu (foto-methioninu, azidohomoalaninu nebo homopropargylglycinu) do sekvence proteinu. V proteinech bude určeno procento substituce methioninu jeho analogem pomocí hmotnostní spektrometrie a následně budou purifikovány. Čisté preparáty budou využity ke studii interakcí a elektronového přenosu mezi cytochromy b5 a P450.
 
Univerzita Karlova | Informační systém UK