Příprava konstruktů kódujících extracelulární čast NK receptoru (NKR-P1D a Clrb). Heterologní exprese zmíněných receptorů v E. coli a optimalizace jejich in vitro složení. Ověření správnosti sbalení receptorů pomocí gelové filtrace, analytické ultracentrifugace, hmotnostní spektrometrie a NMR. Finální studium jejich vzájemné interakce pomocí gelové filtrace, analytické ultracentrifugace, povrchové plasmonové resonace a hmotnostní spektrometrie v kombinaci s chemickým zesítěním.
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
Preparation of constructs coding extracellular part of NK receptors (NKR-P1D and Clrb). Heterologous expression of these receptors in E. coli and optimalization of their refolding. Confirmation of the folding correctness using size-exclusion chromatography, analytical ultracentrifugation, mass spectrometry and NMR. Finally, studies on interactions between NKR-P1D and Clrb membrane receptors exploiting size-exclusion chromatography, analytical ultracentrifugation, surface plasmon resonace and mass spectrometry in combination with chemical cross-linking.