Regulace vnitřního pH kvasinek - vliv vybraných transportních proteinů
Název práce v češtině: | Regulace vnitřního pH kvasinek - vliv vybraných transportních proteinů |
---|---|
Název v anglickém jazyce: | Regulation of intracellular pH in yeast - influence of selected transport proteins |
Akademický rok vypsání: | 2008/2009 |
Typ práce: | diplomová práce |
Jazyk práce: | čeština |
Ústav: | Fyzikální ústav UK (32-FUUK) |
Vedoucí / školitel: | RNDr. Eva Urbánková, Ph.D. |
Řešitel: | |
Konzultanti: | RNDr. Roman Chaloupka, Ph.D. |
Zásady pro vypracování |
1. Vypracovat rešerši na téma regulace vnitřního pH kvasinek a vlivu vybraných transportních proteinů.
2. Změřit reakci vnitřního pH (a případně membránového potenciálu) vybraných kmenů kvasinek na změnu vnějších podmínek (např. hladovění na draslík, solný stres, různé zdroje uhlíku) 3. Pokud již budou dostupné příslušné kmeny, změřit pH ve zvolených organelách a jeho ovlivnění zvolenými mutacemi 4. U vybraných případů se pokusit změřit vtok/výtok draslíku z buněk pomocí K+-selektivní elektrody. 5. Na základě změřených dat interpretovat vliv studovaných transportních systémů pro draselné/sodné ionty na regulaci vnitřního pH. |
Seznam odborné literatury |
1. Sychrova H (2004) Yeast as a model organism to study transport and homeostasis of alkali metal cations. Physiol Res, 53, S91-S98.
2. Serrano R (2002) "Halotolerance genes in yeast" in: Salinity: Environment - plants- molecules, 491-504, Kluwer Academic publishers |
Předběžná náplň práce |
Regulace pH u kvasinek (a to jak cytosolického, tak pH organel) je ovlivněna řadou transportních proteinů. Cílem této práce bude studovat vliv zvolených transportérů (H+-ATPáza, transportéry alkalických kovů) na regulaci pH s využitím zeleného fluorescenčního proteinu citlivého na pH exprimovaného a případně cíleně lokalizovaného ve některých organelách. Ve vybraných případech bude využívána fluorescenční sonda diS-C3(3) pro měření membránového potenciálu a budou studovány změny obou parametrů (vnitřního pH a membránového potenciálu) v reakci na různé vnější podmínky (pěstování na různých zdrojích uhlíku, solný stres, nedostatek draslíku). Pokud budou výsledky ukazovat na tok K+ přes membránu v souvislosti s regulací pH, budou též provedena měření s K+-selektivní elektrodou. |