Exprese a vazebné vlastnosti lidského galektinu-7

• Název práce v češtině: Exprese a vazebné vlastnosti lidského galektinu-7
• Název v anglickém jazyce: Expression and binding properties of human galectin-7
• Klíčová slova: sacharid; galektin; ELISA; E. coli; rakovina
• Akademický rok vypsání: 2023/2024
• Typ práce: bakalářská práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra biochemie (31-250)
• Vedoucí / školitel: doc. RNDr. Pavla Bojarová, Ph.D.
• Řešitel: skrytý - zadáno a potvrzeno stud. odd.
• Datum přihlášení: 22.11.2023
• Datum zadání: 27.11.2023
• Datum potvrzení stud. oddělením: 26.01.2024
• Konzultanti: Mgr. Michaela Hovorková

Seznam odborné literatury

N. A. Pinto et al. Galectin-7 reprograms skin carcinogenesis by fostering innate immune evasive programs. Cell Death & Differentiation 2023, 30, 906–921.
N. W. Sewgobind et al. Functions and inhibition of galectin-7, an emerging target in cellular pathophysiology. Biomolecules 2021, 11, 1720.
G. Masuyer et al. Inhibition mechanism of human galectin-7 by a novel galactose- benzylphosphate inhibitor. FEBS J. 2021, 279, 193-202.

Předběžná náplň práce

Galektiny jsou skupina živočišných proteinů specificky vázajících oligosacharidy obsahující galaktosu na neredukujícím konci. Mají zásadní roli v obranných mechanismech, buněčné proliferaci, apoptóze, adhezi a migraci. Dosud je známo jen málo informací o patofyziologii galektinu-7(Gal-7). Hraje významnou roli při reepitalizaci poranění kůže či rohovky, proliferaci keratinocytů a participuje i při imunitní odpovědi na nádorové bujení, včetně indukce apoptózy rakovinných buněk a ovlivnění jejich migrace. Galektin-7 patří mezi tzv. prototypické galektiny – monomery s jednou doménou rozpoznávající sacharidy (CRD), jež nekovalentně asociují za vzniku homodimerů.
Cílem této práce je heterologně exprimovat lidský galektin-7 a stanovit jeho vazebnou afinitu k vybraným sacharidovým ligandům metodou ELISA. Získané výsledky přispějí k porozumění významu galektinu-7 jako potenciálního terapeutického cíle v glykobiologii.

Cíle práce:
- exprese lidského galektinu-7 z plasmidu připraveného v laboratoři v Escherichia coli a jeho purifikace afinitní chromatografií
- optimalizace imunochemického stanovení ELISA pro měření vazebné afinity galektinu-7 k sacharidovým ligandům
- stanovení afinity galektinu-7 k vybraným sacharidovým ligandům a diskutovat získané výsledky

Metody: práce s DNA, transformace a kultivace E. coli, chromatografická purifikace lektinů, imunochemické stanovení.