Cílem diplomové práce je prozkoumat potenciál, který mohou mít virové částice odvozené od nedávno objeveného myšího papilomaviru (MusPV) pro dopravu diagnostických a terapeutických látek do nádorových buněk. Některé papilomaviry mají totiž přirozenou schopnost selektivně s nádory interagovat. K dispozici je vektor určený pro expresi hlavního kapsidového proteinu L1 a minoritního kapsidového proteinu L2 v savčím expresním systému. V tomto systému budou produkovány tzv. pseudoviriony, které nesou uvnitř kapsidy reportérový vektor. Pomocí tohoto systému lze zjišťovat účinnost transdukce reportéru (kóduje luciferázu a GFP) do různých buněk. Zároveň budou geny L1 a L2 MusPV vloženy do rekombinantního bakuloviru tak, aby bylo možno produkovat virům podobné částice , VLPs, v hmyzích buňkách v dostatečném množství. V diplomové práci budou porovnány vlastnosti VLPs a pseudovirionů odvozených od MPyV a lidského (HPV16), bovinního (BPV1) a myšího (MusPV1) papilomaviru (PV) vzhledem k jejich schopnosti interagovat se škálou nádorových buněk (nádory prostaty, glioblastomy, osteosarkomy, aj,). Zjištění, že MusPv interaguje účinně s nádorovými buňkami, by mohlo napomoci k návrhu nanosystémů pro protinádorovou terapii, neboť proti MusPV neexistují v lidské populaci protilátky a je tak vhodným kandidátem pro případné klinické použití.
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
The aim of this diploma thesis is to investigate the potential of viral particles derived from recently discovered mouse papillomavirus (MusPV) for the transport of diagnostic and therapeutic agents to tumor cells. Some papillomaviruses have a natural capacity to interact selectively with tumors. There is a vector for expression the major capsid protein L1 and the minor capsid protein L2 available. I the mammalian expression system the vector can produce so-called pseudovrions, which carry a reporter vector within the capsid. Using this system, the efficiency of reporter transduction (encoding luciferase and GFP) into different cells can be determined. At the same time, the L1 and L2 MusPV genes will be inserted into the recombinant baculovirus so that virus-like particles, VLPs, can be produced in sufficient quantities in insect cells. In the diploma thesis the properties of VLPs and pseudovirions derived from MPyV and human (HPV16), bovine (BPV1) and mouse (MusPV1) papillomavirus (PV) will be compared for their ability to interact with a range of tumor cells (prostate tumors, glioblastomas, osteosarcomas, ). Finding that MusPv interacts effectively with tumor cells could help to design nanosystems for anticancer therapy because there are no antibodies against MusPV in the human population and VLPs would be a suitable candidates for potential clinical use.
- zadáno vedoucím/školitelem