Detekce CD molekul v reprodukčním traktu a gametách a jejich funkce v reprodukci savců

• Název práce v češtině: Detekce CD molekul v reprodukčním traktu a gametách a jejich funkce v reprodukci savců
• Název v anglickém jazyce: Detection of CD molecules in reproductive tract and gamates and their function in reproduction of mammals
• Klíčová slova: molekuly CD; oocyt; spermie; reprodukce
• Klíčová slova anglicky: CD molecules; oocyt; spermatozoa; reproduction
• Akademický rok vypsání: 2016/2017
• Typ práce: bakalářská práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra biochemie (31-250)
• Vedoucí / školitel: RNDr. Pavla Postlerová, Ph.D.
• Řešitel: skrytý - zadáno vedoucím/školitelem
• Datum přihlášení: 18.11.2016
• Datum zadání: 18.11.2016
• Datum odevzdání elektronické podoby: 25.05.2018
• Oponenti: prof. RNDr. Helena Ryšlavá, CSc.

Předběžná náplň práce

Součástí procesu oplodnění u savců je kooperace gamet, resp. molekul, na úrovni buňky i celého organizmu. V současnosti se uvažuje o několika diferenciačních antigenech (CD molekulách), které by mohly sehrát úlohu v různých krocích fertilizace. Většina z nich jsou glykoproteiny s různými funkcemi v imunitním systému, některé byly popsány na buňkách a tkáních reprodukčního traktu. Dodnes však není znám mechanizmus, kterým se tyto molekuly účastní dozrávání pohlavních buněk a procesu oplodnění. Navíc jejich funkce na spermiích různých druhů savců během procesu reprodukce nebyla dosud detailně studována. Proto analýza diferenciačních antigenů detekovaných na epididymálních a ejakulovaných spermiích kance, býka, popř. člověka jakož i spermiích kapacitovaných a akrosomově zreagovaných v podmínkách in vitro a studium interakce spermie a zona pellucida vajíčka by mohly přispět k objasnění jednotlivých kroků a mechanismů reprodukčního děje na molekulární úrovni. V konečném důsledku by získané výsledky mohly přispět k vysvětlení příčin některých poruch plodnosti. Cílem je studium molekul CD46, CD52, CD9 a CD81 na býčích a kančích, popř. lidských spermiích s využitím monoklonálních protilátek v různých fázích procesu oplodnění. Pokusíme se o lokalizaci těchto diferenciačních antigenů v rámci struktur pohlavních buněk a budeme sledovat jejich případnou modifikaci během reprodukčního procesu.
Metodika: extrakce proteinů, izolace proteinů z povrchu spermie, SDS-elektroforesa, Western blot, imunodetekce, změny v glykosylaci (vazba lektinů), nepřímá imunofluorescenční mikroskopie na buňkách a řezech, PCR