Vliv vybraných zánětlivých agens na proces osteoklastogeneze

• Název práce v češtině: Vliv vybraných zánětlivých agens na proces osteoklastogeneze
• Název v anglickém jazyce: Effect of selected inflammatory agents on the osteoclastogenesis
• Klíčová slova: osteoklast, osteoklastogeneze, osteoporóza, zánět, zánětlivá onemocnění, celiakie, TNF-α, IL-6, IFN-γ, cfDNA
• Klíčová slova anglicky: osteoclast, osteoclastogenesis, osteoporosis, inflammation, inflammatory diseases, celiac disease, TNF-α, IL-6, IFN-γ, cfDNA
• Akademický rok vypsání: 2016/2017
• Typ práce: diplomová práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra antropologie a genetiky člověka (31-110)
• Vedoucí / školitel: RNDr. Pavlína Daňková, Ph.D.
• Řešitel: Mgr. Patrik Škubica - zadáno vedoucím/školitelem
• Datum přihlášení: 21.11.2016
• Datum zadání: 21.11.2016
• Datum odevzdání elektronické podoby: 10.08.2018
• Datum proběhlé obhajoby: 11.09.2018
• Oponenti: MUDr. Markéta Hušáková, Ph.D.

Předběžná náplň práce

Osteoporóza je chronické onemocnění postihující 7-10 % populace ČR, která se vyznačuje snížením kostní denzity a zvýšeným rizikem zlomenin. Celiakie je autoimunitní chronické onemocnění sliznice tenkého střeva způsobené přecitlivělostí na lepek. Ačkoliv byla vysoká koincidence těchto onemocnění dříve chápána jako důsledek snížení absorpce živin ze stravy (kalcia, vitamínu D) z důvodu střevního zánětu, dnes už se předpokládá jiný mechanismus.
Cirkulující monocyty mohou sloužit jako prekurzory pro osteoklasty, tedy mnohojaderné buňky odpovědné za kostní resorpci. Během 14ti denní stimulace monocytů pomocí M-CSF a RANKL lze získat in vitro osteoklasty, jejichž identifikace probíhá především pomocí TRAcP barvení a světelného mikroskopu.
Cílem diplomové práce je zmapovat změny v diferenciaci osteoklastů působením specifických cytokinů, které jsou typické pro mikroprostředí celiakie a pravděpodobně souvisí se zánětlivými procesy probíhajícími ve střevní sliznici. U některých z nich (IFNy, TNF, IL-6) byl prokázán vliv na diferenciaci monocytů v osteoklasty. Pro simulaci mikroprostředí u pacientů s celiakií budou monocyty v průběhu diferenciace stimulovány také pomocí volné DNA, u které se předpokládá zvýšená hladina v séru celiakálních pacientů z důvodu zánětlivých procesů ve střevě. Cílem DP je tedy ověřit in vitro, zda mikroprostředí celiakie může ovlivnit schopnost monocytů diferencovat v osteoklasty, ať již pozitivně nebo negativně, a v případě pozitivní regulace osteoklastogeneze tak napomáhat častému rozvoji osteoporózy u pacientů s celiakií.
Student si mimo jiné osvojí následující techniky: Buněčné kultury, separace monocytů z plné krve, diferenciace monocytů v osteoklasty, fluorescenční imunohistochemické barvení, izolace DNA, RNA, genotypizace, QPCR