Efekt hem arginátu a PKC induktoru na viabilitu, diferenciaci a aktivaci buněk periferní krve zdravých dárců a HIV+ pacientů

• Název práce v češtině: Efekt hem arginátu a PKC induktoru na viabilitu, diferenciaci a aktivaci buněk periferní krve zdravých dárců a HIV+ pacientů
• Název v anglickém jazyce: Effect of heme arginate and a PKC inducer on viability, differentiation and activation of the peripheral blood cells of healthy donors and HIV+ patients
• Klíčová slova: Hem, hemin, PKC induktor, Bryostatin-1, PBMCs, viabilita, diferenciace, aktivace, průtoková cytometrie, latentní HIV-1, reaktivace
• Klíčová slova anglicky: Heme, hemin, PKC inducer, Bryostatin-1, PBMCs, viability, differentiation, activation, flow cytometry, latent HIV-1, reactivation
• Akademický rok vypsání: 2015/2016
• Typ práce: diplomová práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra buněčné biologie (31-151)
• Vedoucí / školitel: MUDr. Zora Mělková, Ph.D.
• Řešitel: skrytý - zadáno vedoucím/školitelem
• Datum přihlášení: 30.11.2015
• Datum zadání: 30.11.2015
• Konzultanti: RNDr. Karel Drbal, Ph.D.

Předběžná náplň práce

Diplomová práce bude spočívat v optimalizaci detekce následované stanovením markerů viability, diferenciace a aktivace mononukleárních buněk perifení krve (PBMCs) zdravých dárců kultivovaných ex vivo v přítomnosti hem arginátu a Bryostatinu-1 pomocí průtokové cytometrie. Následně budou tyto markery stanoveny v PBMCs HIV+ pacientů na antiretrovirové terapii.
Dále mohou být stanoveny intracelulární cytokiny produkované jednotlivými buněčnými elementy pomocí průtokové cytometrie a qPCR. Práce může být rozšířena na studium mechanismů a signálních drah, které podmiňují pozorované fenotypické změny.
Diplomant bude pracovat pouze s neinfekčními vzorky a s inaktivovanými HIV+ vzorky připravenými jinou osobou.

Předběžná náplň práce v anglickém jazyce

The diploma thesis will consist in the optimization of flow cytometric detection followed by the assessment of markers of viability, differentiation and activation in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of healthy donors cultured ex vivo in the presence of heme arginate and Bryostatin-1. Consequently, the same markers will be assessed in PBMCs of HIV+ patients treated with antiretrovirotics.
Additionally, intracellular cytokines produced by the individual cell types might be determined using flow cytometry and qPCR. Further, the work can be extended to the study of mechanisms and signaling cascades underlying the phenotypic changes observed.
The diploma student will work only with non-infectious samples and with inactivated HIV+ samples prepared by another person.