Příprava glutamátkarboxypeptidasy III v savčím expresním systému

• Název práce v češtině: Příprava glutamátkarboxypeptidasy III v savčím expresním systému
• Název v anglickém jazyce: Preparation of glutamate carboxypeptidase III using mammalian expression system
• Klíčová slova: GCPIII, glutamátkarboxypeptidasa III, HEK 293–6E, exprese proteinů, savčí expresní systém
• Klíčová slova anglicky: GCPIII, glutamate carboxypeptidase III, HEK 293–6E, protein expression, mammalian expression system
• Akademický rok vypsání: 2015/2016
• Typ práce: bakalářská práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra fyzikální a makromol. chemie (31-260)
• Vedoucí / školitel: prof. RNDr. Jan Konvalinka, CSc.
• Řešitel: skrytý - zadáno vedoucím/školitelem
• Datum přihlášení: 02.11.2015
• Datum zadání: 02.11.2015
• Datum odevzdání elektronické podoby: 26.05.2017
• Datum proběhlé obhajoby: 14.06.2017
• Oponenti: prof. RNDr. Tomáš Obšil, Ph.D.
• Konzultanti: RNDr. Pavel Šácha, Ph.D.

Předběžná náplň práce

Protein glutamátkarboxypeptidasa III (GCPIII) je homologem už zavedeného prostatického nádorového markeru glutamátkarboxypeptidasy II (GCPII, také nazývaného „prostate specific membrane antigen“ – PSMA). V naší laboratoři připravujeme model myši s vyřazeným genem GCPIII pro studium její funkce. Pro enzymologická studia bude potřeba připravit myší rekombinantní protein. Úkolem bakalářské práce bude připravit extracelulární část myší GCPIII expresí v savčím expresním systému a porovnat její vlastnosti s proteinem exprimovaným v S2 hmyzích buňkách pomocí biofysikálních method (thermofluor, SDS elektroforesa, hmotnostní spektrometrie) i stanovením kinetických parametrů specifických substrátů (substrátů beta-citrylglutamátu a N-acetylaspartylglutamátu) a inhibitorů.