Samčí gametofyt představuje vysoce redukovaný haploidní organismus, který dovoluje studovat vývoj a diferenciaci na úrovni jedné haploidní buňky. Správný vývoj a zrání pylu je kontrolováno pomocí řady regulačních mechanismů. Mezi klíčové patří regulace transkripce a regulace translace. Zatímco při transkripci hrají hlavní úlohu transkripční faktory aktivní v různých stádiích vývoje a jimi rozeznávané regulační sekvence, regulace na translační úrovni představuje studium mechanismu skladování mRNA během zrání pylu a její aktivace po vyklíčení pylového zrna. Eukaryotický iniciační faktor 3 (eIF3) se podílí na iniciaci translace v eukaryotických buňkách s tím, že existují příklady, kdy se jeho jednotlivé podjednotky podílely na selektivní translaci různých transkriptů. Podjednotky eIF3 jsou evolučně konzervované u řady eukaryotických organismů a jsou aktivní také v samčím gametofytu tabáku a huseníčku. Předmětem této práce bude buněčná lokalizace a funkční charakterizace vybraných podjednotek eIF3 účastnících se regulace iniciace translace v pylu a pylových láčkách tabáku a huseníčku stejně jako analýza T-DNA inserčních linií s vyřazenou funkcí zkoumaných proteinů.
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
The male gametophyte represents highly reduced haploid system, an excellent model for developmental and cell differentiation studies at the level of a single haploid cell. Pollen development and maturation is controlled by numerous regulatory mechanisms amongst them transcription and translation represent key regulatory levels. While during transcription play a major role transcription factors active in various stages of development and regulatory sequences recognized by them, regulation at the translational level represents mainly the mRNA storage during pollen maturation and controlled translational activation during progamic phase. Eukaryotic initiation factor 3 (eIF3) is involved in the translation initiation in eukaryotic cells and it was found in association with selectively translated transcripts. eIF3 subunits are evolutionarily conserved in many eukaryotic organisms and hey are active also in the male gametophyte of tobacco and Arabidopsis. The aim of this work is the cellular localization and functional characterization of selected eIF3 subunits involved in translation initiation regulation in tobacco and Arabidopsis pollen and pollen tubes as well as analysis of the appropriate T-DNA insertion lines.