Význam periferního prolaktinu a vrozené imunitní reakce v těžkých imunopatologických stavech.

• Název práce v češtině: Význam periferního prolaktinu a vrozené imunitní reakce ; v těžkých imunopatologických stavech.
• Název v anglickém jazyce: The signifikance of extrapituitary prolactin and innate immune reaction ; in severe immunopathological conditions.
• Klíčová slova: Prolaktin, periferní prolaktin, sepse, TLR ( Toll-like receptory)
• Klíčová slova anglicky: Prolactin, extrapituitary prolactin, sepsis, TLR ( Toll-like receptors)
• Akademický rok vypsání: 2010/2011
• Typ práce: diplomová práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra antropologie a genetiky člověka (31-110)
• Vedoucí / školitel: RNDr. Pavlína Daňková, Ph.D.
• Řešitel: skrytý - zadáno vedoucím/školitelem
• Datum přihlášení: 23.11.2010
• Datum zadání: 23.11.2010
• Datum odevzdání elektronické podoby: 27.08.2012
• Datum proběhlé obhajoby: 11.09.2012
• Oponenti: doc. MUDr. Filip Gabalec, Ph.D.

Předběžná náplň práce

Interakce mezi neuroendokrinním a imunitním systémem hrají klíčovou roli v udržení homeostáze organismu. Tato komunikace je zprostředkována cytokiny, neurotransmitery a hormony cestou autokrinní, parakrinní a endokrinní.
Prolaktin (PRL) je adenohypofyzární hormon produkovaný také řadou mimohypofyzárních tkání včetně buněk imunitního systému. Na periferii PRL působí jako cytokin a aktivuje Th1 imunitní odpověď. Sepse neboli zánětlivá odpověď organismu na těžkou infekci vede k sekreci adrenokortikotropního hormonu a prolaktinu s následnou aktivací adrenálních steroidů a tudíž k amplifikaci obranných mechanismů vrozené imunity. Klíčovými mediátory vrozených imunitních dějů jsou toll-like receptory (TLR), které hrají zásadní úlohu při rozpoznání bakteriálních komponent.
Cílem práce je studovat na základě hypotézy očekávanou aktivaci prolaktinu v monocytech periferní krve u pacientů stižených sepsí či septickým šokem. Předpokládá se, že stimulace PRL je vyvolána aktivací TLR, které zprostředkovávají systémovou odpověď (se sekrecí PRL) během infekce. Pacientům z JIP na transplantační jednotce ÚHKT budou třikrát po sobě pomocí imnomagnetické separace izolovány CD14+ monocyty periferní krve, z nich následně izolována celková RNA a pomocí QPCR techniky budou stanoveny relativní hladiny mRNA genů pro PRL, TLR-2 a TLR-4. Tyto hodnoty budou vzájemně mezi jednotlivými odběry porovnány a budou též porovnány k mRNA hladinám sledovaných genů zdravých osob (Transfúzní oddělení FNKV).
Nové poznatky o úloze periferního prolaktinu během imunitní dysbalance, jež může vést až k celkovému selhání organismu, by pomohly lépe pochopit imunitní děje, které se během sepse odehrávají, a umožnily např. predikci dalšího vývoje pacienta s možností ovlivnění léčby.
Student si osvojí několik molekulárně genetických technik, např. imunomagnetickou separaci, izolace NK, PCR, RT-PCR, QPCR, FCM a další metody.

Předběžná náplň práce v anglickém jazyce

Interactions between the neuroendocrine and immune systems play a key role in maintaining the homeostasis of the organism. This communication is mediated by cytokines, neurotransmitters and hormones through autocrine, paracrine and endocrine manner.
Prolactin (PRL), hormone of anterior pituitary, is produced by a number of other extrapituitary tissues including cell of immune system. On the periphery, PRL acts as a cytokine and activates the Th1 immune response. Sepsis or inflammatory response of organism to severe infection leads to the secretion of adrenocorticotropic hormone and prolactin with subsequent activation of adrenal steroids and thus the amplification of innate immune defense mechanism. The key mediators of innate immune mechanisms are toll-like receptors (TLR), which play a crucial role in recognizing bacterial components.
The aim of this work is to test the hypothesis saying that prolactin production is activated in peripheral blood monocytes in patients suffering from sepsis or septic shock. It is assumed, that PRL is activated by TLRs, which mediate the systemic response (including secretion of PRL) during infection. Peripheral blood CD14+ monocytes from patients hospitalized at the ICU at the Bone Marrow Transplantation Unit of the Institute of Hematology and Blood Transfusion (IHBT) will be isolated three times by immunomagnetic separation. Total RNA isolated from these cells will be used for QPCR technique in order to determine relative values of mRNA genes for PRL, TLR-2 and TLR-4. These values will be compared among the three samples of each patient, and also compared to mRNA levels of monitored genes of the healthy people (Blood Donor Centre, Faculty Hospital Královské Vinohrady).
New findings on the role of peripheral prolactin in immune imbalance, which can lead to total failure of the organism, would help to better understand the immune events undergoing sepsis, and possibly allow for better prediction of patients further development and subsequent opportunity to improve the treatment.
Student will learn several molecular genetic techniques such as immunomagnetic separation, NA isolation, PCR, RT-PCR, QPCR, FCM and other methods.