Výtěžek rekombinantní exprese proteinů prováděné metodou tranzientní transfekce lidské buněčné linie HEK293 je závislý na celé řadě parametrů, jako je použité kultivační médium, transfekční činidlo, jeho poměr k DNA, zvolený typ expresního vektoru (plazmidu), a jejich vzájemné optimální souhry. Cílem práce je optimalizovat, resp. porovnat několik nových typů kultivačního média, produkčních kmenů buněk a také nový expresní vektor, a to v první fázi s modelovými proteiny GFP a SEAP a následně systém ověřit pro expresi jiných cílových proteinů.
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
The yield of recombinant protein expression by transient transfection of the HEK293 human cell line depends on a number of parameters such as the culture medium used, the transfection reagent, its ratio to DNA, the type of expression vector (plasmid) chosen, and their optimal interplay. The aim of this work is to optimize or compare several new types of culture medium, production cell strains as well as a new expression vector, in a first phase with model proteins GFP and SEAP and then validate the system for expression of other target proteins.
- zadáno a potvrzeno stud. odd.