Protinádorová a imunomodulační aktivita HPMA kopolymerních konjugátů nesoucích gemcitabin a docetaxel v kombinaci s „immune checkpoint“ inhibitory a komplexy IL-2
Název práce v češtině:
Protinádorová a imunomodulační aktivita HPMA kopolymerních konjugátů nesoucích gemcitabin a docetaxel v kombinaci s „immune checkpoint“ inhibitory a komplexy IL-2
Název v anglickém jazyce:
Antitumor and immunomodulatory effects of HPMA copolymer conjugates bearing gemcitabine and docetaxel in combination with immune checkpoint inhibitors and IL-2 complexes
Tento projekt je zaměřen na návrh a vývoj systémů pro dopravu léčiv na bázi HPMA kopolymerů nesoucích cytostatika gemcitabin a docetaxel. Tato kancerostatická léčiva jsou navázána na polymerní nosič prostřednictvím amidové, respektive hydrazonové vazby pro umožnění jejich kontrolovaného uvolňování a použití různých spojek mezi léčivem a nosičem zajistí odlišnou kinetiku uvolňování navázaných léčiv. Tyto systémy budou testovány zejména na modelech karcinomu pankreatu (myší buněčné linie Panc02, lidské buněčné linie Panc01, MiaPaca a BxPC-3) a také na modelech karcinomu prsu (myší buněčná linie 4T1) a karcinomu plic (myší buněčná linie LL2). Základní testování protinádorových účinků in vitro bude zahrnovat test inkorporace 3H‑thymidinu, MTT test a stanovení aktivity při indukci apoptózy pomocí Annexin‑V testu. Protinádorová aktivita polymerních konjugátů in vivo bude studována na myších syngenních nádorových modelech a na lidských xenografech rostoucích v Nu/Nu nebo Rag1-/- imunokompromitovaných myších po pečlivém vyhodnocení jejich toxicity a stanovení maximální tolerované dávky. Budeme také studovat vliv léčby těmito polymerními konjugáty na expresi genů souvisejících s buněčným cyklem/proliferací, apoptózou, angiogenezí, metastatickým šířením a interakcemi nádoru a imunitního systému pomocí real‑time PCR. Dále plánujeme studovat imunomodulační aktivitu těchto polymerních konjugátů prostřednictvím stanovení jejich účinku na populace imunitních buněk, které hrají negativní roli v progresi nádoru, tj. na MDSC, Treg buňky a TAM pomocí průtokové cytometrie. V neposlední řadě chceme také studovat potenciál zlepšení terapeutické účinnosti těchto polymerních konjugátů prostřednictvím kombinace s imunoterapií (monoklonální protilátky proti receptorům CTLA-4 a PD-1, komplexy IL-2 selektivně stimulující CD25+ T lymfocyty). Projekt je založen na úzké spolupráci se skupinou T. Etrycha (Oddělení biomedicínských polymerů, IMC, Praha) a je financován GAČR (22-20548S) a Národním ústavem pro výzkum rakoviny (LX22NPO5102).
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
This project is focused on design and development of HPMA copolymer-based drug delivery systems bearing cytostatic drugs gemcitabine and docetaxel. These cancerostatic drugs are attached to polymer carrier via amide or hydrazone bond, respectively, to facilitate their controlled release and various spacers providing different release kinetics of the bound drugs will be employed. These drug delivery systems will be tested particularly in the models of pancreatic carcinoma (mouse cell lines Panc02, human cell lines Panc01, MiaPaca and BxPC-3) as well as in the models of mammary carcinoma (mouse cell line 4T1) and lung carcinoma (mouse cell line LL2). The primary testing of in vitro anticancer activities will include 3H-thymidine incorporation assay, MTT assay and determination of their activity to induce apoptosis by Annexin-V binding assay. In vivo antitumor activity of the polymer conjugates will be studied in mouse syngeneic tumor models and in human xenograft growing in either Nu/Nu or Rag1-/- immunocompromised mice after careful evaluation of their toxicities and determination of maximum tolerated dose. We will also study the effect of the treatment with these polymer conjugates on expression of genes related to cell cycle/proliferation, apoptosis, angiogenesis, metastatic spread and tumor-immune system interaction using Real-time PCR. Next, we plan to study the immunomodulatory activity of these polymer conjugates through evaluating their effect on immune cell subsets playing a negative role in tumor progression, i.e. MDSCs, Treg cells and TAMs via flow cytometry. Finally, we want also to study the potential to improve the therapeutic efficacy of these polymer conjugates via combination with immune check point inhibitors (anti-CTLA-4 and anti-PD-1 mAbs) and IL-2 complexes selectively stimulating CD25+ T cells. The project is based on tight collaboration with T. Etrych´s group (Department of Biomedicinal Polymers, IMC, Prague) and it is founded by GAČR (22-20548S) and by National Institute for Cancer Research (LX22NPO5102).
- zadáno vedoucím/školitelem