Mikrotubuly a jejich dynamika jsou nezbytnou součástí řady buněčných dějů, jako je například vnitrobuněčný transport, pohyb nebo růst buněk. Mutace v tubulinech a proteinech asociovaných s mikrotubuly jsou spojovány s řadou lidských patologií, zejména v oblasti neurodegenerativních onemocnění. Pro pochopení patologických projevů je ale nezbytné dokonale porozumět dynamice mikrotubulů v přirozených, nepatologických podmínkách. Diplomový projekt si klade za cíl ustanovit model pro studium proteinů asociovaných s mikrotubuly (MAPs) s využitím organismu Caenorhabditis elegans. Budou připraveny kmeny exprimující značené MAPs specificky v exkretorní buňce. Tato buňka vykazuje specifické uspořádání mikrotubulů, které je možné pozorovat pomocí fluorescenční mikroskopie na živých jedincích. V takto připravených kmenech může být dále provedena eliminace exprese jednotlivých MAPs pomocí RNA interference a sledována jejich vzájemná fyzická a funkční interakce. Navrhovaný model dále umožní přímo posoudit vliv exprese MAPs nebo její ztráty na chování buňky, neboť buněčné výběžky se v průběhu vývoje definovaně prodlužují a je tak možné analyzovat jejich délku v závislosti na experimentálních podmínkách. Hlavními metodickými přístupy práce bude příprava transgenních kmenů C. elegans, fluorescenční mikroskopie na živých jedincích a RNA interference. Práce by měla přispět k pochopení úlohy MAPs v dynamice mikrotubulů.
- zadáno a potvrzeno stud. odd.