Meiotické zrání oocytů je klíčovou fází vývoje samičích gamet. Během tohoto procesu dochází k rozpadu jaderné membrány, vytvoření meiotického vřetene, rozdělení genetické informace a vyloučení prvního pólového tělíska. Do přirozeného řízení meiotického zrání zasahuje řada látek antropogenního původu, které v současné době stále více kontaminují životní prostředí. Jednou z látek, jejíž využití se zvyšuje, je triklosan – látka, která se jevila úspěšná ve snižování bakteriální kontaminace. Triklosan je součástí většiny mycích i čisticích prostředků a řady dalších spotřebitelských výrobků, a i proto v době koronavirové epidemie produkce triklosanu roste. Do organismu prostupuje prostřednictvím kůže i sliznic. Metabolity triklosanu byly prokázány například v lidské moči, mateřském mléku a první studie naznačují i negativní vliv na reprodukci. Studium lidských oocytů zákonitě naráží na řadu omezení. Prasečí oocyt jako model sdílí řadu podobností s oocytem lidským a výzkum meiotického zrání na prasečím modelu může významně přispět k objasnění mechanismu účinku triklosanu a jeho vlivu na lidské zdraví. Projekt se proto zaměří na účinky nízkých dávek triklosanu na průběh meiotického zrání prasečích oocytů, sledování utváření meiotického vřetene a expresi vybraných proteinových markerů. Vybrané cíle budou imunofluorescenčně značeny, snímány konfokálním mikroskopem a hodnoceny pomocí metod analýzy obrazu.
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
Meiotic maturation is a key phase in the development of female gametes. During this process, the nuclear membrane breaks down, the meiotic spindle forms, the genetic information is divided and the first polar body is extruded. The natural control of meiotic maturation is affected by many compounds of anthropogenic origin that are now increasingly contaminating the environment. One substance whose use is increasing is triclosan, a substance that has been successful in reducing bacterial contamination. Triclosan is a component of most detergents and cleaning products, as well as many other consumer products, which is why triclosan production is increasing during the coronavirus epidemic. It enters the body through the skin and mucous membranes. Metabolites of triclosan have been detected in human fluids, for example, in urine and breast milk. Early studies suggest a negative effect on reproduction. The study of human oocytes inevitably faces a number of limitations. The porcine oocyte as a model shares many similarities with the human oocyte and research on meiotic maturation in the porcine model may contribute significantly to the understanding of the mechanism of the effect of triclosan and its impact on human health. The project will therefore focus on the effects of low doses of triclosan on the meiotic maturation of pig oocytes, monitoring the formation of the meiotic spindle and the expression of selected protein markers. Selected targets will be immunofluorescently labeled, captured by confocal microscopy, and assessed by image analysis methods.