Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů
| Název práce v češtině: | Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů |
|---|---|
| Název v anglickém jazyce: | Induction of oxidative stress in skin keratinocyte cells |
| Klíčová slova: | sirný yperit, buněčná linie HaCaT, buněčná viabilita, kyselá fosfatáza, dichloro-dihydro-fluorescein diacetát, oxidační stress |
| Klíčová slova anglicky: | sulfur mustard, HaCaT cell lines, cell viability, acid phosphatase assay, dichloro-dihydro-fluorescein diacetate, oxidative stress |
| Akademický rok vypsání: | 2021/2022 |
| Typ práce: | diplomová práce |
| Jazyk práce: | čeština |
| Ústav: | Katedra biochemických věd (16-16160) |
| Vedoucí / školitel: | PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. |
| Řešitel: | skrytý - zadáno vedoucím/školitelem |
| Datum přihlášení: | 11.11.2021 |
| Datum zadání: | 01.12.2021 |
| Datum a čas obhajoby: | 02.06.2023 09:00 |
| Datum odevzdání elektronické podoby: | 14.05.2023 |
| Datum proběhlé obhajoby: | 02.06.2023 |
| Oponenti: | PharmDr. Kateřina Hradiská Breiterová, Ph.D. |
| Konzultanti: | Mgr. Petr Jošt, Ph.D. |
| Zásady pro vypracování |
| 1) Proveďte literární rešerši na téma: sirný yperit (vlastnosti, mechanismus účinku, příznaky otravy s důrazem na zasažení kůže, možnosti terapie), oxidační stres, mechanismy působení oxidačního stresu na buněčné úrovni, význam glutathionu v reakci na oxidační stres, možnosti laboratorního sledování známek oxidačního stresu. 2) Nastudujte a prakticky proveďte kultivaci buněk HaCaT a jednotlivých klonů odvozených z této linie. 3) Nastudujte a prakticky proveďte stanovení viability buněk spektrofotometrickým měřením aktivity enzymu kyselá fosfatasa. 4) Nastudujte a prakticky proveďte měření intracelulární hladiny reaktivních forem kyslíku (ROS) pomocí fluorescenční sondy dichloro-dihydro-fluorescein diacetát. 5) Proveďte sběr laboratorních dat a ve vhodném programovém prostředí data vyhodnoťte a statisticky zpracujte. Dosažené výsledky vhodně graficky prezentujte a proveďte jejich diskuzi. |
| Seznam odborné literatury |
| FIROOZ, Alireza, Bardia SADR, Seyed M. DAVOUDI, Mansour NASSIRI-KASHANI, Yunes PANAHI a Yahya DOWLATI, 2011. Long-term skin damage due to chemical weapon exposure. Cutaneous and Ocular Toxicology [online]. 30(1), 64–68. ISSN 1556-9535. Dostupné z: doi:10.3109/15569527.2010.529547 NARAGHI, Zahra Safaee, Parvin MANSOURI a Mohammadreza MORTAZAVI, 2005. A clinicopathological study on acute cutaneous lesions induced by sulfur mustard gas (yperite). European journal of dermatology: EJD. 15(3), 140–145. ISSN 1167-1122. O’DONOVAN, Mike, 2012. A critique of methods to measure cytotoxicity in mammalian cell genotoxicity assays. Mutagenesis [online]. 27(6), 615–621. ISSN 0267-8357. Dostupné z: doi:10.1093/mutage/ges045 ROTHMILLER, Simone, Sarah SCHRÖDER, Romano STROBELT, Markus WOLF, Jin WANG, Xiqian JIANG, Franz WOREK, Dirk STEINRITZ, Horst THIERMANN a Annette SCHMIDT, 2018. Sulfur mustard resistant keratinocytes obtained elevated glutathione levels and other changes in the antioxidative defense mechanism. Toxicology letters [online]. 293, 51–61. ISSN 0378-4274. Dostupné z: doi:10.1016/j.toxlet.2017.11.024 BOUKAMP, P., R. T. PETRUSSEVSKA, D. BREITKREUTZ, J. HORNUNG, A. MARKHAM a N. E. FUSENIG, 1988. Normal keratinization in a spontaneously immortalized aneuploid human keratinocyte cell line. The Journal of Cell Biology [online]. 106(3), 761–771. ISSN 0021-9525. Dostupné z: doi:10.1083/jcb.106.3.761 |