Study of the materno-fetal and feto-maternal microchimerism of the APCs using advanced microscopic techniques

• Název práce v češtině: Studium maternálně-fetálního a fetálně-maternálního mikrochimérismu APCs využitím pokročilých mikroskopických technik
• Název v anglickém jazyce: Study of the materno-fetal and feto-maternal microchimerism of the APCs using advanced microscopic techniques
• Akademický rok vypsání: 2020/2021
• Typ práce: disertační práce
• Jazyk práce: angličtina
• Ústav: Katedra buněčné biologie (31-151)
• Vedoucí / školitel: prof. RNDr. Jan Černý, Ph.D.
• Řešitel: skrytý - zadáno vedoucím/školitelem
• Datum přihlášení: 07.10.2020
• Datum zadání: 07.10.2020

Předběžná náplň práce

Mikrochimérismus se stal všeobecně přijímaným fenoménem. Rozvoj vizualizačních technologií, efektivní způsoby získávání a analýzy histologických dat nám nabízí jedinečné nástroje pro vyhledávání a charakterizaci vzácných buněčných populací, které během prenatálního vývoje migrují mezi jedinci. Projekt se zaměřuje na mezigenerační přenos antigen prezentujících buněk (APCs) s využitím myšího modelu C57BL/6 myši. Pro charakterizaci přenosu APCs bude využit v naší laboratoři dlouhodobě etablovaný MHC II EGFP knock-in myší model. Přenos MHC II. třídy positivní buněčné populace bude korelován s kompletním buněčným přenosem. Zde bude využit červený fluorescenční Gt(ROSA)26Sortm4(ACTB-tdTomato,-EGFP)Luo/J, známým také pod názvem ROSAmT/mG. Tato kombinace modelů umožní simultánní „dvoubarevnou“ detekci mikrochimérních populací u kříženců výše zmíněných modelů. Zaměříme se zejména na potenciální přenos buněk mezi matkou a novorozencem prostřednictvím mateřského mléka. Pro to budou využity kromě C57BL/6 myší i imunodeficientní příjemci (Nu/nu, RAG/NOD knouck-out myší modely, zde je možné očekávat vyšší procento přežívajících buněk1,2). Cílem je odhalit potenciální roli buněčného mikrochimérismu při kompenzaci patologických fenotypů (imunodeficit) a roli při možném přenosu mikrobioty. Zde je plánováno testování hypotézy o aktivní roli APC při mezigeneračním přenosu endocytované mikrobioty, navíc s využitím germ free/gnotobiologických modelů.
A

Předběžná náplň práce v anglickém jazyce

Concept of microchimerism (MC) is generally accepted phenomenon. Development in visualization techniques, effective data mining and analysis of histological data offer an great tools to search for and characterize the rare cellular populations which migrate during prenatal development between individuals. Project is focused on the inter-generational transfer of antigen presenting cells (APC) using mouse C57BL/6 model. For describing transfer of APCs we’ll use in our laboratory well established MHC class II EGFP knock-in mouse model. Transfer of MHCII+ cell populations will be correlated with complete cell transmission. Red fluorescence mouse model Gt(ROSA)26Sortm4(ACTB-tdTomato,-EGFP)Luo/J, also known as ROSAmT/mG will be applied. This combination of models enables a “two-color” detection of MC population in particular cross between the models mentioned above. We’ll focus on potential mother-newborn cellular transfer via breast milk. To test this hypothesis we plan to use also
immunodeficient recipients (Nu/nu mouse, RAG/NOD knockout mouse, in which we can anticipate higher percentage of survivors1,2). Main reason is to address the potential role of the cell MC in the compensation of pathological phenotype/immunodeficiency and possible role in the microbiota transfer. At this stage we are planning to test hypothesis of active role that APCs could play in the intergenerational transfer of endocytosed microbiota with use of germfree/gnotobiological models.