Příprava expresních vektorů regulujících buněčný cyklus a apoptózu pro optimalizaci expresního systému HEK293 buněčné linie

• Název práce v češtině: Příprava expresních vektorů regulujících buněčný cyklus a apoptózu pro optimalizaci expresního systému HEK293 buněčné linie
• Název v anglickém jazyce: Preparation of Expression Vectors That Regulate Cell Cycle and Apoptosis to Optimize Expression System of HEK293 Cell Line
• Klíčová slova: buněčný cyklus, apoptóza, růstový faktor, inhibitor cyklin-dependentní kinázy, regulátor apoptózy, rekombinantní exprese, HEK293, tranzientní transfekce
• Klíčová slova anglicky: cell cycle, apoptosis, growth factor, cyclin-dependent kinase inhibitor, apoptosis regulator, reombinant expression, HEK293, transient transfection
• Akademický rok vypsání: 2011/2012
• Typ práce: bakalářská práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra biochemie (31-250)
• Vedoucí / školitel: RNDr. Ondřej Vaněk, Ph.D.
• Řešitel: skrytý - zadáno vedoucím/školitelem
• Datum přihlášení: 01.11.2011
• Datum zadání: 11.11.2011
• Datum odevzdání elektronické podoby: 24.05.2012
• Datum proběhlé obhajoby: 07.06.2012
• Oponenti: prof. RNDr. Markéta Martínková, Ph.D.

Předběžná náplň práce

Výtěžek rekombinantní exprese proteinů prováděné metodou tranzientní transfekce lidské HEK293 buněčné linie je přímo úměrný délce produkční fáze kultivace buněk. Tu je možno prodloužit cílenou zvýšenou expresí proteinů regulujících (zastavujících) buněčný cyklus a/nebo apoptosu. Cílem práce je upravit expresní plazmid pTT5 tak, aby umožňoval intracelulární expresi proteinů, dále amplifikovat celkem 6 různých genů pro tyto regulační proteiny (výchozí DNA je již připravena) a přenést je do upraveného expresního plazmidu.

Předběžná náplň práce v anglickém jazyce

The yield of recombinant protein expression performed by a transient transfection of human HEK293 cell line is directly proportional to the length of the production phase of the cell cultivation. It is possible to prolong the production phase by purposeful overexpression of proteins regulating (stopping) the cell cycle and/or apoptosis. The aim of the thesis is to modify expression plasmid pTT5 in order to facilitate intracellular protein expression, further to amplify in total 6 genes for these different regulatory proteins (starting DNA is already prepared) and transfer them into the modified expression plasmid.