Molekulární metody v environmentálních vědách - MO550P103
|
|
|
||
Poslední úprava: Ing. Luboš Matějíček, Ph.D. (07.05.2009)
Kurs je zaměřen na přehled základních technik molekulární genetiky a proteomiky a jejich využití v environmentálním mikrobiálním výzkumu. Zvláštní zřetel je kladen na techniky práce s nukleovými kyselinami při hodnocení biodiverzity v životním prostředí. Kurz je doplněn rozborem konkrétních příkladů environmentálního výzkumu kombinujících presentované metody. Sylabus 1. Úvod do environmentální mikrobiologie (mikroorganismy v environmentálním výzkumu) 2. Vliv organických polutantů v ŽP na mikroorganismy (nejčastější typy polutantů v ŽP, testy toxicity, mutagenicity a ED aktivity využívající mikroorganismy) 3. Přehled molekulárních metod v environmentálním výzkumu, základy molekulárních metod (izolace DNA, struktura DNA ? transkripce - PCR, translace - struktura proteinů - vlastnosti proteinů důležité pro proteomické metody) 4. Metody proteomové analýzy (SDS PAGE, IEF, 2D separace proteinů, LC-MS) 5. Kapalinová chromatografie pro purifikaci proteinů (izolace redox enzymů pro využití v in vitro degradacích polutantů) 6. PCR techniky pro identifikaci mikroorganismů v ŽP, pro detekci produkce redox enzymů v ŽP (srovnání klasických kultivačních technik s DNA metodami, srovnání využití DNA a RNA metodických postupů, real-time PCR) 7. Příklady využití DNA a RNA metodických postupů (hodnocení enzymatického potenciálu jednotlivých organismů a v environmentálních vzorcích) 8. DGGE analýza (princip metody, modifikace primerů a annealing teploty v PCR, srovnání s TGGE) 9. využití DGGE pro hodnocení biodiverzity- konkrétní případy 10. Využití molekulárních metod pro hledání biotechnologicky významných mikrobiálních enzymů 11. konzultace Literatura: Úvod do molekulární biologie I-III.díl, S. Rosypal, 2. vydání, 1997, Masarykova Univerzita, Brno. Wastewater Microbiology, G. Bitton, Third Edition, 2005, John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, New Jersey, ISBN: 0-471- 65071-4. Introduction to Environmental Analysis, R. Reeve, 2002, John Wiley & Sons Ltd, ISBNs: 0-471-49294-9 (Hardback); 0- 470-84578-3 (Electronic). Fundamentals of Environmental Sampling and Analysis, Chunlong (Carl) Zhang, 1st Edition, 2007, John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, New Jersey, ISBN: 978-0-471-71097-4. Environmental Biotechnology, Hans-Joachim Jördening and Josef Winter (Ed.), 1st Edition, 2005, WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim, ISBN: 3-527-30585-8. Wood production, wood technology and biotechnological impacts, U. Kües, (Ed.), 1st Edition, 2007, Universitätsverlag Göttingen, ISBN 978-3-940344-11-3. |