Témata prací (Výběr práce)Témata prací (Výběr práce)(verze: 368)
Detail práce
   Přihlásit přes CAS
Analýza zotavování membránového potenciálu kvasinek za stresových podmínek vyvolaných protonoforem CCCP
Název práce v češtině: Analýza zotavování membránového potenciálu kvasinek za stresových podmínek vyvolaných protonoforem CCCP
Název v anglickém jazyce: The analysis of membrane potential recovery in yeast under CCCP-induced stress
Klíčová slova: kvasinky; Saccharomyces cerevisiae; vnitrobuněčné pH; membránový potenciál; pHluorin; dis-C3(3); CCCP; stres; fluorescence
Klíčová slova anglicky: yeast; Saccharomyces cerevisiae; intracellular pH; membrane potential; pHluorin; dis-C3(3); CCCP; stress; fluorescence
Akademický rok vypsání: 2017/2018
Typ práce: rigorózní práce
Jazyk práce: čeština
Ústav: Katedra makromolekulární fyziky (32-KMF)
Vedoucí / školitel: prof. RNDr. Jaromír Plášek, CSc.
Řešitel: skrytý - zadáno a potvrzeno stud. odd.
Datum přihlášení: 04.01.2018
Datum zadání: 04.01.2018
Datum potvrzení stud. oddělením: 04.01.2018
Datum a čas obhajoby: 09.05.2018 00:00
Datum odevzdání elektronické podoby:04.01.2018
Datum odevzdání tištěné podoby:04.01.2018
Datum proběhlé obhajoby: 09.05.2018
Zásady pro vypracování
1. Navrhnout a optimalizovat metodu sledování časového vývoje intracelulárního pH kvasinek obsahujících pHluorin s využitím fluorimetru Fluoromax3 a “Multigroup Acquisition” módu.

2. Kalibrace vztahu mezi vlnovou délkou maxima emise sondy diS-C3(3) a mírou reálné depolarizace kvasinek v suspenzích stanovené metodou synchronně skenované fluorescence

3. Detailní popis průběhu zotavování membránového potenciálu kvasinek za stresových podmínek vyvolaných protonoforem CCCP zahrnující:
a) analýzu vývoje intracelulárního pH po aplikaci CCCP, včetně závislosti tohoto efektu na koncentraci CCCP,
b) vztah mezi poklesem ustálené hodnoty membránového potenciálu, koncentrací protonoforu CCCP a intracelulárním pH,
c) vliv koncentrace extracelulárního draslíku na reakci kvasinek na přidání CCCP,
d) porovnání chování buněk sklizených v různých růstových fázích, od raně exponenciální po stacionární.
Seznam odborné literatury
Alberts et al. edit. Molecular Biology of the Cell, 5th edition, Garland Science, New York, 2008; vybrane kapitoly.

Feldmann, H. Yeast: Molecular and Cell Biology. J. Wiley & Sons, 2010.

Lakowicz, J. R. Principles of fluorescence spectroscopy, 3rd edition, Kluwer Academic/Plenum Publishers, New York , 2006

Sted-Knudsen, O . Biological Membranes, Cambridge University Press, Cambridge, 2002.

Tsien, R.Y.: The green fluorescent protein. Annu. Rev. Biochem. 67 (1998): 509-544.

Vo-Dinh, T. (1981) Synchronous excitation spectroscopy, in Modern Fluorescence Spectroscopy, Vol. 4 (E.C. Wehry, Ed.), Plenum Press, New York, pp. 167-192.

Plášek J, Gášková D, Ludwig J, Höfer M.: Early changes in membrane potential of Saccharomyces cerevisiae induced by varying extracellular K+, Na+ or H+ concentrations. J. Bioenerg. Biomembr. 45 (2013 ) 45:561–568.
Drietomska A et al. Interplay of Tok1p K+ channel and H+-ATPase in yeast Saccharomyces cerevisiae membrane potential response to CCCP-induced stress: dependence on growth phase (rukopis článku v recenzním řízení)

Aktuální časopisecká literatura doporučená vedoucím.
 
Univerzita Karlova | Informační systém UK