velikost textu
Toxicita pulegónu a mentofuránu a ich vplyv na expresiu miRNA v ľudských pečeňových rezoch
Upozornění: Informace získané z popisných dat či souborů uložených v Repozitáři závěrečných prací nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora.
Název:
Toxicita pulegónu a mentofuránu a ich vplyv na expresiu miRNA v ľudských pečeňových rezoch
Název v češtině:
Toxicita pulegonu a menthofuranu a jejich vliv na expresi miRNA v lidských jaterních řezech
Název v angličtině:
Toxicity of pulegone and menthofuran and their effect on miRNA expression in human liver slices
Typ:
Rigorózní práce
Autor:
Mgr. Bibiána Lancošová
Vedoucí:
PharmDr. Iva Boušová, Ph.D.
Oponent:
Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D.
Id práce:
215735
Fakulta:
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové (FaF)
Pracoviště:
Katedra biochemických věd (16-16160)
Program studia:
Farmacie (M5206)
Obor studia:
Farmacie (FAR)
Přidělovaný titul:
PharmDr.
Datum obhajoby:
26. 9. 2019
Výsledek obhajoby:
Prospěl/a
Jazyk práce:
Slovenština
Abstrakt:
ABSTRAKT
Univerzita Karlova
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové
Katedra biochemických věd
Kandidát: Bibiána Lancošová
Školiteľ: doc. PharmDr. Boušová Iva, Ph.D
Názov diplomovej práce: Toxicita pulegónu a mentofuránu a ich vplyv na expresiu miRNA v
ľudských pečeňových rezoch
Monoterpény ako sekundárne rastlinné metabolity charakteristickej vône majú
pozitívny vplyv na ľudské telo a uplatňujú sa nielen v kozmetickom a potravinárskom
priemysle, ale aj pri liečení. R-pulegón (PUL) a jeho metabolit R-mentofurán (MF) sú najviac
zastúpené v rastlinách rodu Mentha (Mäta), pričom vyššie dávky týchto látok vykazujú isté
riziko hepatotoxicity. Cieľom tejto práce bolo stanoviť koncentráciu, pri ktorej dochádza k
zníženiu životaschopnosti pečeňových buniek, a taktiež sledovať zmeny expresie jednotlivých
mikroRNA pôsobením PUL, MF a paracetamolu ako referenčnej látky.
Biologickým materiálom na testovanie hepatotoxicity bolo 5 ľudských vzoriek pečene
získaných od pacientov oboch pohlaví vo veku 57 až 73 rokov. Vzorky boli uchovávané v Euro-
Collins roztoku a následne nakrájané na ultratenké tkaninové rezy s hrúbkou 150-170 µm,
umiestnené do 12-jamkovej dosky a vložené do inkubačného média na dobu 24 hodín
s testovanými látkami. Toxicita bola stanovená meraním hladiny ATP, zmeny expresie
pomocou qPCR.
PUL preukázal zvyšujúcu sa toxicitu priamo úmerne k zvyšujúcej sa koncentrácii vo
všetkých piatich vzorkách, MF a APAP len v dvoch z piatich vzoriek. Z výsledkov toxicity bola
stanovená EC50 u MF približne 418 µM a u PUL približne 293 µM. U PUL došlo k zmenám
expresie u miR-122, miR-155, miR-192 a miR-885. MF pozmenil expresiu u miR-192, miR-
155 a v menšej miere u miR-885 a miR-125b. Získané výsledky poukazujú na značnú spojitosť
medzi testovanými monoterpénmi a zmenami expresie miRNA, ale aj hepatotoxicitou.
Hepatotoxicita týchto látok sa však môže medzi jedincami významne líšiť vďaka
interindividuálnym rozdielom, ktoré sme pozorovali aj v našich výsledkoch.
Abstract v angličtině:
ABSTRACT
Charles University
Faculty of Pharmacy in Hradec Králové
Department of Biochemical Sciences
Candidate: Bibiána Lancošová
Supervisor: doc. PharmDr. Boušová Iva, Ph.D
Title of diploma thesis: Toxicity of pulegone and menthofuran and their effect on miRNA
expression in human liver slices
Monoterpenes are secondary plant metabolites, characterised by their odour, which have
a positive impact on human body and are used not only in cosmetic and food industry, but also
in medication. R-pulegone (PUL) and its metabolite R-menthofuran (MF) are the most
represented in plants of genus Mentha (Mint), with higher doses of these substances exerting
certain risk of hepatotoxicity. The aim of this thesis was to assess the concentration, at which
the viability of liver cells decreases and also to observe the changes in individual microRNA
expression as a result of influence of PUL, MF and paracetamol, as the reference compound.
Five samples of human liver obtained from patients of both genders and at age of 57 to
73 years represented biological material for hepatotoxicity testing. The samples were stored in
Euro-Collins solution and subsequently cut into precision-cut liver slices with thickness of 150-
170 µm, placed to 12-well plate and put into incubation medium with the tested substances for
24 hours. The toxicity was determined by measuring of ATP levels, expression changes by
qPCR.
PUL showed increasing toxicity proportional to its increasing concentration in each of
the five samples, MF and APAP in only two of the five samples. From the results of toxicity,
EC50 was calculated and for MF was approximately 418 µM and for PUL approximately 293
µM. PUL caused changes in expression of miR-122, miR-155, miR-192 a miR-885. MF
modified the expression of miR-192, miR-155 and of miR-885 and miR-125b to a lesser extent.
Obtained results point to a considerable relation between tested monoterpenes and changes in
miRNA expression as well as the hepatotoxicity. However, the hepatotoxicity of these
substances may vary significantly between individuals due to the inter-individual differences,
which we observed in our results.
Dokumenty
| Stáhnout | Dokument | Autor | Typ | Velikost |
|---|---|---|---|---|
| Stáhnout | Text práce | Mgr. Bibiána Lancošová | 4.69 MB | |
| Stáhnout | Abstrakt v českém jazyce | Mgr. Bibiána Lancošová | 133 kB | |
| Stáhnout | Abstrakt anglicky | Mgr. Bibiána Lancošová | 129 kB | |
| Stáhnout | Posudek vedoucího | PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. | 278 kB | |
| Stáhnout | Posudek oponenta | Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. | 280 kB | |
| Stáhnout | Záznam o průběhu obhajoby | 145 kB |