velikost textu
Stanovení stechiometrie komplexů dehydrosilybinu A s mědí
Upozornění: Informace získané z popisných dat či souborů uložených v Repozitáři závěrečných prací nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora.
Název:
Stanovení stechiometrie komplexů dehydrosilybinu A s mědí
Název v angličtině:
Determination of the stoichiometry of the copper complexes with dehydrosilybine A
Typ:
Rigorózní práce
Autor:
Mgr. Kateřina Klimková
Vedoucí:
PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D.
Oponent:
Prof.MUDr. Radomír Hrdina, CSc.
Konzultant:
doc. Ing. Kateřina Valentová, Ph.D.
Id práce:
215721
Fakulta:
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové (FaF)
Pracoviště:
Katedra farmakologie a toxikologie (16-16170)
Program studia:
Farmacie (M5206)
Obor studia:
Farmacie (FAR)
Přidělovaný titul:
PharmDr.
Datum obhajoby:
26. 9. 2019
Výsledek obhajoby:
Prospěl/a
Jazyk práce:
Čeština
Klíčová slova:
měď, chelatace, stechiometrie, silymarin, ostropestřec
Klíčová slova v angličtině:
copper, chelation, stoichiometry, silymarin, milk thistle
Abstrakt:
Abstrakt
Univerzita Karlova
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové
Katedra farmakologie a toxikologie
Kandidát: Kateřina Klimková
Školitel: doc. PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph. D.
Konzultant: doc. Ing. Kateřina Valentová, Ph.D.
Název diplomové práce: Stanovení stechiometrie dehydrosilybinu A s mědí
Silymarin, extrakt semen ostropestřce mariánského (Silybum marianum), je hojně využívané
registrované volně dostupné léčivo, které je doporučováno na řadu onemocnění jater. Jako
jednu z komponent obsahuje flavonolignan 2,3-dehydrosilybin A, který má ve své struktuře
vhodné vazebné místo pro kovy. Obecně mohou flavonolignany právě vzhledem ke svým
strukturním předpokladům interagovat v gastrointestinálním traktu s přechodnými kovy za
tvorby komplexů, čehož lze využít při ochraně před nadměrným množstvím kovu v organismu.
Cílem této in vitro studie bylo analyzovat interakci 2,3-dehydrosilybinu A s mědí, která jako
kofaktor enzymů podílejících se na správné činnosti organismu zastává roli nepostradatelného
prvku lidského organismu, nicméně při zvýšené hladině může v organismu působit toxicky.
Stechiometrie, jedna z nejvýznamnějších charakteristik komplexu, byla zjištěna UV-Vis
spektrofotometrií ve čtyřech (pato)fyziologických pH podmínkách (4,5; 5,5; 6,8; 7,5) pomocí
dvou nekompetitivních metod: Jobovou metodou a komplementární metodou. Tyto metody se
vzájemně liší svými principy. Při Jobově metodě se udržuje celková molární koncentrace dvou
reaktantů konstantní, zatímco molární koncentrační poměry těchto dvou reaktantů se průběžně
mění. Během komplementární metody se konstantní udržuje molární koncentrace mědi,
přičemž molární koncentrace látky se mění. Bylo zjištěno, že 2,3-dehydrosilybin A je středně
aktivní chelátor Cu2+, s nimiž tvořil komplexy o výsledné stechiometrii 2:1 či 3:1,
flavonolignan:Cu2+. Stechiometrie 2:1 se v závislosti na podmínkách měnila v důsledku
nadbytku testované látky ve stechiometrii 3:1. Oproti tomu Cu+ ionty nebyly 2,3-
dehydrosilybinem A vázány za žádných testovaných podmínek. Tyto in vitro výsledky mohou
v budoucnu sloužit jako podklad pro bližší charakteristiku testování účinku 2,3-
dehydrosilybinu A na absorpci mědi v buněčných kulturách in vitro a v in vivo podmínkách.
Abstract v angličtině:
Abstract
Charles University
Faculty of Pharmacy in Hradec Králové
Department of Pharmacology and Toxicology
Candidate: Kateřina Klimková
Supervisor: Assoc. Prof. Přemysl Mladěnka, Pharm. D., Ph.D.
Consultant: Assoc. Prof. Kateřina Valentová, Ph.D.
Title of Thesis: Determination of the stoichiometry of the copper complexes with
dehydrosilybin A
Silymarin, the standardized extract of the milk thistle (Silybum marianum), is a widely used
approved over-the-counter drug that is recommended for a number of liver diseases. Silymarin
contains as one of its components 2,3-dehydrosilybin A, which has an appropriate metal binding
site in its structure. In general, flavonolignans, due to their structure, can interact with transition
metals in the gastrointestinal tract by forming complexes. This property can be useful for the
protection against excessive amounts of metals in the body. The aim of this in vitro study was
to analyse the interaction of 2,3-dehydrosilybin A with copper, which plays a crucial role in the
organism as a cofactor of many enzymes. Although being an essential element, it can, however,
be toxic at elevated levels. Stoichiometry, as one of the most important characteristics
of the complex, was determined by UV-Vis spectrophotometry in four (patho)physiological pH
conditions (4.5; 5.5; 6.8; 7.5) using two non-competitive methods: the Job‘s Method and
the Complementary method. Principles of the methods are different. In the Job‘s method
the concentration of both components is changing, while total concentration is constant. During
the complementary approach the molar concentration of chelator is changing while the
concentration of metal is kept constant. 2,3-Dehydrosilybin A was found to be a moderately
active Cu2+ chelator. The final stoichiometry was 2:1 or 3:1, flavonolignan:Cu2+. The 2:1
stoichiometry was changing depending on the conditions due to the excess of the tested
substance in the 3:1 stoichiometry. In contrast, Cu+ ions were not bound by 2,3-dehydrosilybin
A in none of the tested conditions. These in vitro results could be used in the future as a basis
for a more detailed characterization of the effect of 2,3-dehydrosilybin A on the absorption of
copper in cell cultures at in vitro level and in vivo conditions.
Dokumenty
Stáhnout | Dokument | Autor | Typ | Velikost |
---|---|---|---|---|
Stáhnout | Text práce | Mgr. Kateřina Klimková | 16.75 MB | |
Stáhnout | Abstrakt v českém jazyce | Mgr. Kateřina Klimková | 125 kB | |
Stáhnout | Abstrakt anglicky | Mgr. Kateřina Klimková | 128 kB | |
Stáhnout | Posudek vedoucího | PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. | 279 kB | |
Stáhnout | Posudek oponenta | Prof.MUDr. Radomír Hrdina, CSc. | 273 kB | |
Stáhnout | Záznam o průběhu obhajoby | 94 kB |