velikost textu
Vliv vybraných cytostatik určených pro terapii leukémie na aktivitu lidských enzymů redukujících karbonylovou skupinu
Upozornění: Informace získané z popisných dat či souborů uložených v Repozitáři závěrečných prací nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora.
Název:
Vliv vybraných cytostatik určených pro terapii leukémie na aktivitu lidských enzymů redukujících karbonylovou skupinu
Název v angličtině:
Effect of selected cytostatics for the treatment of leukemia on the activity of human carbonyl reducing enzymes
Typ:
Rigorózní práce
Autor:
Bc. Monika Šmídlová
Vedoucí:
Mgr. Eva Novotná, Ph.D.
Oponent:
Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D.
Id práce:
212913
Fakulta:
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové (FaF)
Pracoviště:
Katedra biochemických věd (16-16160)
Program studia:
Zdravotnická bioanalytika (N5207)
Obor studia:
Odborný pracovník v laboratorních metodách (OPLM)
Přidělovaný titul:
RNDr.
Datum obhajoby:
17. 6. 2019
Výsledek obhajoby:
Prospěl/a
Jazyk práce:
Čeština
Klíčová slova:
reduktázy, leukémie, cytostatika, inhibice
Klíčová slova v angličtině:
reductases, leukemia, cytostatics, inhibition
Abstrakt:
Abstrakt
Univerzita Karlova
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové
Katedra biochemických věd
Kandidát: Bc. Monika Šmídlová
Školitel: RNDr. Eva Novotná, Ph.D.
Název diplomové práce: Vliv vybraných cytostatik určených pro terapii leukémie na aktivitu
lidských enzymů redukujících karbonylovou skupinu
Klíčová slova: reduktázy, leukémie, cytostatika, inhibice
K léčbě akutních myeloidních leukémií (AML) i akutních lymfoidních leukémií (ALL) se stále
hojně používají anthracyklinová antibiotika, především daunorubicin. I přes vysokou efektivitu
těchto léčiv je léčba limitována kvůli kardiotoxicitě a rezistenci nádorových buněk vůči
anthracyklinům. Mezi mechanismy, které se podílí na vzniku anthracyklinové rezistence patří
metabolická přeměna (redukce) anthracyklinů na méně účinné sekundární alkoholy, která je
katalyzovaná enzymy ze skupiny aldo-ketoreduktas (AKR) a dehydrogenas/reduktas
s krátkým řetězcem (SDR).
Objevení vhodných inhibitorů AKR a SDR enzymů by tak mohlo pomoci k překonání
anthracyklinové rezistence i ke snížení kardiotoxicyty způsobené těmito léčivy.
Cílem této diplomové práce bylo zjistit, zda kyselina all-trans-retinová, cyklofosfamid,
cytarabin, kladribin a prednisolon inhibují anthracyklinreduktasy AKR1A1, AKR1B10, AKR1C3
a AKR7A2 a CBR1.
Metodika diplomové práce zahrnovala in vitro inkubace výše uvedených enzymů se
substrátem daunorubicinem v prostředí sodno-fosfátového pufru, izolaci daunorubicinolu jako
produktu metabolické přeměny daunorubicinu a stanovení jeho množství pomocí vysoce
účinné kapalinové chromatografie (UHPLC). Z naměřených hodnot byly vypočítány hodnoty
specifické aktivity jednotlivých enzymů, které byly porovnány.
Nejvyšší inhibice byla zjištěna v případě kyseliny all-trans-retinové, která významně snížila
aktivitu enzymů AKR1B10 (IC50 = 75,4 µM) a AKR1C3 (IC50 = 1,2 µM). Dále došlo k významné
inhibici také v případě prednisolonu vůči enzymu AKR1C3 (IC50 = 57,6 µM).
Abstract v angličtině:
Abstract
Charles University
Faculty of Pharmacy in Hradec Králové
Department of Biochemical sciences
Candidate: Bc. Monika Šmídlová
Supervisor: RNDr. Eva Novotná, Ph.D.
Title of diploma thesis: Effect of selected cytostatics for the treatment of leukemia on the activity
of human carbonyl reducing enzymes
Key words: reductases, leukemia, cytostatics, inhibition
Anthracycline antibiotics, especially daunorubicin, are widely used for the treatment of acute
myeloid leukemia (AML) and acute lymphocytic leukemia (ALL).
Although the efficacy of these drugs is high, treatment is still limited due to cardiotoxicity and
tumor cell resistance to anthracyclines.
Mechanisms that contribute to the formation of anthracycline resistance include metabolic
biotransformation (reduction) to less efficient secondary alcohols. The reduction is calatyzed
by carbonyl reducing enzymes belonging to aldo-keto reductase (AKR) and short chain
dehydrogenase/reductase (SDR) superfamilies.
The discovery of AKR and SDR inhibitors could help to overcome anthracycline resistance and
also reduce cardiotoxicity caused by these drugs.
The aim of the diploma thesis was to find out whether all-trans-retinoic acid,
cyclophosphamide, cytarabine, cladribine and prednisolone are able to inhibit anthracycline
reductases AKR1A1, AKR1B10, AKR1C3, AKR7A2 and CBR1.
The methodology of the diploma thesis includes in vitro incubation of the enzymes with
daunorubicin as substrate in sodiumphosphate buffer, isolation of daunorubicinol from the
reaction mixture and measurement of its amount by high performance liquid chromatography
(UHPLC). The amount of daunorubicinol determined by UHPLC is then used to calculate the
specific activity.
The most aktive inhibitors were all-trans-retinoic acid that decresed the activity of AKR1B10
(IC50 = 74,5 µM) and AKR1C3 (IC50 = 1,2 µM) and prednisolone that decreased activity of
AKR1C3 (IC50 = 57,6 µM).
Dokumenty
Stáhnout | Dokument | Autor | Typ | Velikost |
---|---|---|---|---|
Stáhnout | Text práce | Bc. Monika Šmídlová | 2.36 MB | |
Stáhnout | Abstrakt v českém jazyce | Bc. Monika Šmídlová | 420 kB | |
Stáhnout | Abstrakt anglicky | Bc. Monika Šmídlová | 249 kB | |
Stáhnout | Posudek vedoucího | Mgr. Eva Novotná, Ph.D. | 93 kB | |
Stáhnout | Posudek oponenta | Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. | 279 kB | |
Stáhnout | Záznam o průběhu obhajoby | 283 kB |