velikost textu
Intelligent nanofibres functionalized with growth factors and blood derivatives for dermatology applications
Upozornění: Informace získané z popisných dat či souborů uložených v Repozitáři závěrečných prací nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora.
Název:
Intelligent nanofibres functionalized with growth factors and blood derivatives for dermatology applications
Název v češtině:
Inteligentní nanovlákna funkcionalizovaná růstovými faktory a krevními deriváty pro dermatologické aplikace
Typ:
Disertační práce
Autor:
MUDr. Karolína Vocetková, Ph.D.
Školitel:
RNDr. Evžen Amler, CSc.
Oponenti:
prof. MUDr. Jozef Rosina, Ph.D.
Id práce:
154023
Fakulta:
2. lékařská fakulta (2.LF)
Pracoviště:
Ústav biofyziky (13-714)
Program studia:
Lékařská biofyzika (P5110)
Obor studia:
-
Přidělovaný titul:
Ph.D.
Datum obhajoby:
2. 5. 2019
Výsledek obhajoby:
Prospěl/a
Jazyk práce:
Angličtina
Klíčová slova:
Tkáňové inženýrství kůže, Elektrostatické zvlákňování, Centrifugační zvlákňování, Dodávání bioaktivních látek, Trombocyty
Klíčová slova v angličtině:
Skin Tissue Engineering, Electrospinning, Centrifugal Spinning, Drug Delivery, Platelets
Abstrakt:
ABSTRAKT
Krevní deriváty jsou výborným zdrojem přirozených růstových faktorů. V tkáňovém
inženýrství a regenerativní medicíně již našly řadu uplatnění.
Cílem této práce bylo optimalizovat podmínky buněčné kultury za použití destičkového
lyzátu, a dále vyvinout mikro- a nanovlákenné nosiče funkcionalizované krevními destičkami,
které by mohly sloužit jako systém řízeného dodávání přírodních růstových faktorů. Mikro- a
nanovlákenné nosiče byly připraveny elektrostatickým a centrifugačním zvlákňováním PCL.
Připravené nosiče byly funkcionalizovány povrchovou adhezí krevních destiček nebo jejich
enkapsulací do vnitřní části nanovláken emulzní technikou.
V rámci studie kultivačních podmínek kožních buněk bylo zjištěno, že suplementace media
7% destičkovým lyzátem je dostačující pro nahrazení 10% FBS v kultuře keratinocytů a
fibroblastů. Dále byl povrch PCL nanovláken připravených elektrostatickým zvlákňováním
funkcionalizován krevními destičkami. Při kontaktu s nanotopografií nanovlákenného povrchu
došlo k aktivaci destiček a následně k vytvoření fibrinové sítě, která sloužila jako rezervoár
růstových faktorů. Díky tomu došlo k prodloužení poločasu uvolnění EGF až na 1.7 dní. Takto
funkcionalizované nanovlákenné nosiče podporovaly proliferace a metabolickou aktivitu
keratinocytů, fibroblastů a melanocytů. Při adhezi krevních destiček na mikro-/nanovlákna
vytvořená centrifugačním zvlákňováním došlo k dvounásobnému nárůstu množství růstových
faktorů zachycených na nosiči, a následně k další stimulaci metabolické aktivity nasazených
melanocytů. Díky enkapsulaci destičkového lyofilizátu do koaxiálních nanovláken byl vytvořen
systém dlouhodobého dodávání, který byl otestován pomocí fibroblastů a keratinocytů. Díky své
univerzálnosti by však mohl hrát roli i v jiných odvětvích tkáňového inženýrství.
Abstract v angličtině:
ABSTRACT
Platelet derivatives are an attractive source of natural growth factors and they are
widely used in various tissue engineering and regenerative medicine applications.
The aim of this study was to optimize cell culture conditions using platelet lysate and
to develop platelet-functionalized fibrous scaffolds as a controlled drug delivery system
for native growth factors. Fibrous scaffolds were prepared by electrostatic and centrifugal
spinning of PCL and they were functionalized by the platelets by surface adhesion or their
encapsulation using emulsion spinning techniques.
The cell culture study determined the 7% platelet lysate to be the optimum
concentration as a medium supplement in keratinocyte and fibroblast culture. Additionally,
following surface adhesion of the platelets to PCL electrospun nanofibres, the platelets
were activated due to their contact with the nanofibre nanotopography, resulting in
formation of fibrin network. Fibrin served as a reservoir of the growth factors, prolonging
the half-time of EGF release to 1.7 days. Such platelet-functionalized samples fostered
proliferation of keratinocytes, fibroblasts and melanocytes. Furthermore, adhesion of
platelets to centrifugally spun nanofibrous scaffolds resulted in almost two-fold increase
in the amount of immobilized platelet-derived bioactive molecules, further promoting
metabolic activity of the seeded melanocytes. Thanks to encapsulation of the platelet
lyophilisate into emulsion electrospun and centrifugal spun coaxial nanofibres, a drug
delivery system enabling long-term delivery of platelet-derive biomolecules was
developed and optimized. The system was successfully tested in vitro using keratinocytes
and fibroblasts, however, its versatility suggests broader application.
Dokumenty
Stáhnout | Dokument | Autor | Typ | Velikost |
---|---|---|---|---|
Stáhnout | Text práce | MUDr. Karolína Vocetková, Ph.D. | 9.78 MB | |
Stáhnout | Abstrakt v českém jazyce | MUDr. Karolína Vocetková, Ph.D. | 178 kB | |
Stáhnout | Abstrakt anglicky | MUDr. Karolína Vocetková, Ph.D. | 173 kB | |
Stáhnout | Posudek oponenta | prof. MUDr. Jozef Rosina, Ph.D. | 3.83 MB | |
Stáhnout | Posudek oponenta | prof. MUDr. Petr Arenberger, DrSc. MBA | 342 kB | |
Stáhnout | Záznam o průběhu obhajoby | 3.97 MB |