|
|
|
||
Poslední úprava: RNDr. Daniel Kavan, Ph.D. (07.02.2019)
Praktikum zajišťují: Helena Ryšlavá, Veronika Hýsková, Renata Ptáčková a Daniel Kavan. Studenti se seznámí se základními biochemickými metodami. Metodou, která má široké uplatnění v biochemii, je gelová chromatografie, studenti separují protein ze směsi nebo stanoví relativní molekulovou hmotnost neznámého proteinu. Separace proteinů a stanovení relativní molekulové hmotnosti se provádí rovněž elektroforézou v polyakrylamidovém gelu v přítomnosti SDS. Velká pozornost je věnována zásadám práce s enzymy: stanovení specifické aktivity enzymu, zjištění afinity enzymu k substrátu, stanovení maximální rychlosti reakce, pH optima, sledování časového průběhu reakce a vliv inhibitorů a aktivátorů na enzymovou reakci. Přítomnost izoenzymů je demonstrována na příkladu laktátdehydrogenasy, kterou studenti separují v polyakrylamidovém gelu za nativních podmínek a detekují enzymovou aktivitu v gelu. |
|
||
Poslední úprava: RNDr. Daniel Kavan, Ph.D. (07.02.2018)
http://www.natur.cuni.cz/chemie/biochem/ke-stazeni/biochemicke-praktikum Laboratorní cvičení z biochemie, editoři: Doc. RNDr. M. Kodíček, CSc. a Doc. RNDr. O. Valentová, CSc.; Praha 2000 |
|
||
Poslední úprava: RNDr. Daniel Kavan, Ph.D. (29.09.2021)
Podmínky získání zápočtu:
1. provedení všech úloh praktika
2. napsání výstupního testu
3. odevzdání zkontrolovaných a opravených protokolů |
|
||
Poslední úprava: RNDr. Daniel Kavan, Ph.D. (04.05.2021)
Studenti vypracují vždy jednu úlohu z následujících okruhů úloh:
1. Gelová chromatografie
2. Separace proteinů elektroforézou v polyakrylamidovém gelu v prostředí SDS a stanovení relativní molekulové hmotnosti těchto proteinů
3. Sledování afinity enzymu k substrátu - určení Michaelisovy konstanty a maximální rychlosti reakce
4. Určení pH optima, sledování vlivu inhibitorů a aktivátorů na aktivitu enzymu, časový průběh enzymové reakce, detekce enzymové aktivity v polyakrylamidovém gelu |