Poslední úprava: doc. RNDr. Tomáš Křížek, Ph.D. (09.01.2024)
Praktikum ze separačních metod je zaměřeno na osvojení si teoretických znalostí i experimentálních dovedností z oblasti pokročilé analytické instrumentace. Studenti budou řešit čtyři komplexní úlohy s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní detekcí, plynové chromatografie hmotnostní nebo plamenově ionizační detekcí (dle volby studenta), kapilární zónové elektroforézy a chirální kapilární elektroforézy.
Studenti budou po absolvování praktika schopni v rámci kapilární elektroforézy, kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní detekcí a plynové chromatografie s plamenově-ionizační nebo hmotnostní detekcí:
Na uživatelské úrovni podle návodu samostatně ovládat přístroje a samostatně provádět analýzy.
Vyhodnotit a interpretovat experimentální záznamy.
Ze získaných výsledků vyvodit patřičné závěry.
Zpracovat průběh experimentů, výsledky a závěry do přehledného protokolu bez závažných věcných a formálních nedostatků.
Poslední úprava: doc. RNDr. Tomáš Křížek, Ph.D. (09.01.2024)
The laboratory course on separation methods is focused on gaining theoretical knowledge as well as experimental skills in advanced analytical instrumentation. Students will solve four complex problems using high-performance liquid chromatography with tandem mass detection, gas chromatography with mass or flame ionization detection (student's choice), capillary zone electrophoresis, and chiral capillary electrophoresis.
After passing this course students will be able in capillary electrophoresis, liquid chromatography with tandem mass spectrometry, and gas chromatography with flame-ionization or mass detection:
Independently operate instruments and perform analyses on the basic user level with written instructions.
Evaluate and interpret the experimental records.
Draw appropriate conclusions from the results.
Create a concise report containing a description of the experimental work, results, and conclusions, without serious factual or formal errors.
Literatura -
Poslední úprava: prof. RNDr. Zuzana Bosáková, CSc. (24.09.2014)
Analytické separační metody, K. Štulík a kol., Karolinum, Praha, 2005. Encyclopedia of Separation Science. M. Crooke, C. F. Poole (Eds.) Academic Press 2000 Chromatography today, C.F. Poole, S.K. Poole, Elsevier, Amsterdam, 1991.
Další elektronické podklady nejsou dostupné
Poslední úprava: doc. RNDr. Karel Nesměrák, Ph.D. (28.10.2019)
Analytické separační metody, K. Štulík a kol., Karolinum, Praha, 2005. Encyclopedia of Separation Science. M. Crooke, C. F. Poole (Eds.) Academic Press 2000 Chromatography today, C.F. Poole, S.K. Poole, Elsevier, Amsterdam, 1991.
Požadavky ke zkoušce -
Poslední úprava: doc. RNDr. Tomáš Křížek, Ph.D. (05.09.2023)
Účast v praktiku, vypracování příslušných protokolů, přezkoušení u jednotlivých úloh, zisk minimálně 60 % bodů v závěrečném testu.
Poslední úprava: doc. RNDr. Tomáš Křížek, Ph.D. (05.09.2023)
Participation in the practical exercises, submission of appropriate reports, examinations for individual tasks, and scoring minimum 60% in the final test.
Sylabus -
Poslední úprava: doc. RNDr. Tomáš Křížek, Ph.D. (05.09.2023)
1) V úloze budou enantioseparovány tři aminokyseliny pomocí cyklodextrinového chirálního selektoru metodou kapilární elektroforézy. Bude určeno eluční pořadí jednotlivých enantiomerů a provedena kvantifikace metodou standardního přídavku. 2) Úloha bude zaměřena na vývoj HPLC-MS/MS metody pro analýzu vybraných organických polutantů. Důraz bude kladen na optimalizaci vlastní MS/MS detekce. 3) Úloha využívá plynovou chromatografii, studenti si dle svého zájmu mohou zvolit z varianty s plamenově ionizačním detektorem a varianty s hmotnostním spektrometrem. 4) Úloha je zaměřena na separaci a stanovení amonných sodných a draselných iontů v moči kapilární elektroforézou.
Poslední úprava: doc. RNDr. Tomáš Křížek, Ph.D. (05.09.2023)
1) Three amino acids will be separated using a cyclodextrin-based chiral selector by capillary electrophoresis. The migration order of individual enantiomers will be determined. Enantiomers will be quantified using the standard addition method. 2) An HPLC-MS-MS method for analysis of selected organic pollutants will be developed. Focus will be on the optimization of MS/MS detection. 3) This exercise comprises gas chromatography with flame ionization or mass spectrometry detection. Students can choose according to their interests. 4) Ammonium, sodium and potassium ions in urine are separated and determined using capillary electrophoresis.
