Mikroinjekční a mikromanipulační praktikum - MB151C02

• Anglický název: Microinjection and micromanipulation - practical course
• Český název: Mikroinjekční a mikromanipulační praktikum
• Zajišťuje: Katedra buněčné biologie (31-151)
• Fakulta: Přírodovědecká fakulta
• Platnost: od 2020
• Semestr: zimní
• E-Kredity: 3
• Způsob provedení zkoušky: zimní s.:
• Rozsah, examinace: zimní s.:0/2, Z [TS]
• Počet míst: 20
• Minimální obsazenost: neomezen
• 4EU+: ne
• Virtuální mobilita / počet míst pro virtuální mobilitu: ne
• Stav předmětu: vyučován
• Jazyk výuky: čeština
• Poznámka: povolen pro zápis po webu
• Garant: doc. RNDr. Ing. Vladimír Krylov, Ph.D.
• Vyučující: Mgr. Zuzana Burdíková, Ph.D.; doc. RNDr. Ing. Vladimír Krylov, Ph.D.; Mgr. Marie Macůrková, Ph.D.; RNDr. Tereza Tlapáková, Ph.D.

Anotace

čeština

Poslední úprava: doc. RNDr. Ing. Vladimír Krylov, Ph.D. (18.09.2019)

Cílem praktik je seznámit studenty s mikroinjekčními a mikromanipulačními technikami na modelu háďátka (C. elegans) a drápatky (X. laevis a X. tropicalis). V kurzu bude taktéž využita light sheet a live cell imaging mikroskopie.

angličtina

Poslední úprava: doc. RNDr. Ing. Vladimír Krylov, Ph.D. (18.09.2019)

The aim of this practical course is to familiarize students with microinjection and micromanipulation techniques on the model of round worm (C. elegans) and clawed frogs (Xenopus laevis and Xenopus tropicalis). Students will have also the oportunity to work with advanced microscopic systems such as light sheet and live cell immaging microscopy.

Literatura

čeština

Poslední úprava: RNDr. Nataša Šebková, Ph.D. (24.10.2019)

Literatura bude k dispozici na každém kurzu.

angličtina

Poslední úprava: RNDr. Nataša Šebková, Ph.D. (24.10.2019)

Literature will be available at each course.

Požadavky ke zkoušce

čeština

Poslední úprava: RNDr. Nataša Šebková, Ph.D. (21.02.2018)

docházka, vypracování protokolů z cvičení, zvládnout výuku v anglickém jazyce. 

angličtina

Poslední úprava: doc. RNDr. Ing. Vladimír Krylov, Ph.D. (26.08.2019)

course attendance, working out the practical course protocols, to be able to communicate in English language.

 

Sylabus

čeština

Poslední úprava: doc. RNDr. Ing. Vladimír Krylov, Ph.D. (18.09.2019)

Úloha1: RNA interference embryonálně letálního genu u C. elegans

 

- seznámení s morfologií C. elegans, princip RNA interference

- in vitro syntéza dsRNA

- příprava nástrojů pro mikroinjekci (kapiláry, podložky pro imobilizaci C. elgens

- seznámení s mikromanipulátorem, vlastní mikroinjekce

 

Úloha2: Studium migračního potenciálu kmenových buněk

 

- problematika kmenových buněk

- seznámení se s modelovým organizmem Xenopus tropicalis

- příprava RFP pozitivních Sertoliho kmenových buněk odvozených z varlat X. tropicalis a pěstovaných v buněčné kultuře pro mikroinjekční experiment

- analýza buněk před mikroinjekcí pomocí cell counteru

- příprava médií, kapilár a nástrojů pro mikroinjekci

- mikroinjekce Sertoliho kmenových buněk do pulců X. tropicalis

- light sheet mikroskopie - pozorování a záznam migračních tras mikroinjikovaných buněk

- příprava fotodokumentace.

Předmět je vyučován za podpory projektu Zvýšení kvality vzdělávání na UK a jeho relevance pro potřeby trhu práce, reg.č. CZ.02.2.69/0.0/0.0/16_015/0002362.

angličtina

Poslední úprava: doc. RNDr. Ing. Vladimír Krylov, Ph.D. (18.09.2019)

Task 1: RNA interference of the embryonic lethal gene in C. elegans.

 

- C. elegans morphology, principle of the RNA interference

- in vitro synthesis of dsRNA

- preparation of microinjection tools (capillary, pads for the C. elegans immobilization)

- familiarization with the micromanipulator, microinjection process

 

Task 2: Study of migration potential of stem cells

 

- what are stem cells?

- meet Xenopus!

- preparation of RFP positive Sertoli stem cells derived from the testes of X. tropicalis juvenile male for the microinjection

- preparation of media, capillary and microinjection tools

- microinjection of Sertoli stem cells into X. tropicalis tadpoles

- light sheet microscopy - observation of migration routes of microinjected cells in living tadpoles

- preparation of photodocumentation

The course is taught with the support of the project reg. number CZ.02.2.69/0.0/0.0/16_015/0002362