|
|
|
||
Poslední úprava: doc. RNDr. Helena Lipavská, Ph.D. (04.01.2018)
Doporučuje se předem absolvovat některou z přednášek Fyziologie rostlin a přednášky ze základů molekulární biologie. |
|
||
Poslední úprava: LIPAVSKA (19.04.2007)
Vieten A, Sauer M, Brewer P.B, Friml J. (2007) Molecular and cellular aspects of auxin transport-mediated development, TIPS, 4, 160-168
Paciorek T and Friml J. (2006) Auxin signalling, Journal of Cell Science, 119, 1199-202.
Morris D, Friml J, Zažímalová E. (2004) The Transport of Auxins. In: Davies P.J. (Ed.): Plant Hormones: Biosynthesis, Signal Transduction, Action, Kluwer Academic Publishers. s. 437 - 470, ISBN: 1-4020-2685-4. (Textbook)
|
|
||
Poslední úprava: doc. RNDr. Helena Lipavská, Ph.D. (10.04.2012)
ústní zkouška |
|
||
Poslední úprava: VOTRUB (01.03.2004)
A. Současné přístupy a metody experimentální rostlinné genetiky
1. Historický vývoj experimentálních přístupů Modelový organismus Arabidopsis thaliana - výhody a nevýhody.
2. Výběr oblíbeného genu a. "Monte Carlo" přístupy výběru genu b. Od proteinu zpět ke genu c. Funkční komplementace d. Výběr na základě expresse Enhancer a Gene trap Rozdíly v expresi (substraktivní hybridizace, microarray) e. Forward genetika Mutageneza (EMS, T-DNA, transposon, aktivační tagging) Střídavé štěstí genetického screeningu Identifikace a ověření genu Supressor screen f. QTL
3. Funkce genu a. Reverzní genetika (knihovny mutantů, TILLING) b. Ektopická exprese c. Chiméry a mozaiky d. Site directed mutageneza, výměny domén e. Analýza fenotypu f. Biochemické přístupy, heterologní systémy
4. Exprese a lokalizace a. Northern a Western bloty, RT-PCR b. Reportérové geny (transkripční a translační fůze, použití) c. mRNA in situ hybridizace d. Lokalizace proteinů in situ
5. Přátelé a sousedi a. Yeast-two-hybrid b. Split ubiquitin c. Genetické interakce d. Upstream and downstream
6. Jiné metody a přístupy a. DR5 auxin response reporter b. Transient transfection c. Heterologní systémy d. Laserové ablace and laser capture
B. Od signálu ke genu
1. Etylén - Učebnicový úspěch genetiky Genetická analýza etylénové signální dráhy, posloupnost a funkce molekulárních členů, dvoukomponentový systém histidin kinázy
2. Cytokinin - Příklad složitosti hormonální regulace u rostlin. Syntéza, degradace, percepce, přenos signálu. Identifikace a verifikace receptorů a dalších členů signální kaskády. Poznatky ze studia protoplastů.
3. Auxin - Velmi žádaný, stále nepochopený Objev auxinu. Izolace členů signální kaskády: biochemie (ABP1), genetika (AXRs), molekulární biologie (AUX/IAA a ARF proteiny), pokus o ucelený model.
4. Transport auxinu - PINy a jiná zvířena Fyziologie, Chemiosmostický model, molekulární komponenty (PIN a AUX proteiny) - exprese, lokalizace, funkce.
C. Od procesu k mechanismu
1. Embryogeneze - apikální-bazální osa Pattern formation v embryogenezi. Mutanti Arabidopsis thaliana, identity genů, možná role auxinu, distribuce a transport auxinu, exprese, lokalizace a role PIN proteinů, buněčná polarita, ucelený model.
2. Kořenový meristém - zpět ke kořenům Kořenový meristém Arabdidopsis, mezibuněčné signály: klidové centrum<>kmenové buňky, auxin jako možný signál, radial patterning - SHR/SCR.
3. Organogeneze - jednota v různosti Přehled různých organogenních procesů, orgány odvozené ze stonku a kořene, vzájemný vztah mezi místními gradienty auxinu, transportem a vývojem orgánů.
4. Jednotící principy - gradienty morfogenů a růstové osy
D. Do buňky
1. Vnitrobuněčný transport a buněčná polarita Recyklace proteinů auxinového transportu, inhibitory auxinového transportu a jejich efekty, význam recyklace pro auxinový transport, endocytosa v rostlinách, polární targetování.
2. Poučení z GNOMu Izolace mutanta gnom, GNOM protein - biochemická funkce a role ve vývoji rostliny. Souvislost s transportem auxinu. GNOM a recyklace endozomů.
3. Gravitropismus kořene - integrace přístupů Fyziologie, genetika, molekulární a buněčná biologie gravitropismu: Spojení různých přístupů pro pochopení jednoho procesu. |