The course demonstrates basic techniques used for preparation of protist parasites for biochemical experiments. It demonstrates cell homogenization and fractionation using differential and isopycnic gradient centrifugation, spectrophotometric determinations of enzyme activities and liquid chromatography methods of protein purification.
Last update: Hrdý Ivan, doc. RNDr., Ph.D. (25.10.2019)
Praktikum seznamuje se základními technikami preparace jednobuněčných parazitů pro biochemické experimenty. Demonstruje různé metody homogenizace buněk, buněčnou frakcionaci a purifikaci organel za použití diferenciální a isopyknické centrifugace, spektrofotometrické stanovení kinetických parametrů enzymů, purifikaci a charakterizaci proteinů různými typy kapalinové chromatografie a další biochemické analytické metody. Praktikum nelze zapsat, pokud student zároveň nebo v předchozím studiu neabsolvoval přednášku B160P17. Počet studentů na praktiku je omezen maximálně na 10.
Last update: Hrdý Ivan, doc. RNDr., Ph.D. (21.03.2019)
Literature -
Relevant literature: M.P. Deutscher: Guide to Protein Purification. Academic Press 1990.
Detailed and up-to-date protocols will available for every projet during the course.
Last update: Hrdý Ivan, doc. RNDr., Ph.D. (25.10.2019)
Odborná literatura: M.P. Deutscher: Guide to Protein Purification. Academic Press 1990.
Podrobné tištěné a aktualizované protokoly jsou k dispozici ke každé úloze během praktika.
Last update: Hrdý Ivan, doc. RNDr., Ph.D. (25.10.2019)
Requirements to the exam -
Active participation on the course, mastering of the methods, calculation of kinetic and molecular parameters of the studied proteins, 100% attendance.
Last update: Hrdý Ivan, doc. RNDr., Ph.D. (25.10.2019)
Aktivní zvládnutí procvičovaných úloh, zvládnutí výpočtů kinetických a molekulárních parametrů studovaných proteinů, 100% docházka.
Last update: Hrdý Ivan, doc. RNDr., Ph.D. (25.10.2019)
Syllabus -
1. Cell homogenization methods
2. Methods of cell fractionation, isolation of organelles