Příprava, exprese a purifikace konstruktů rekombinantních polymeráz
Thesis title in Czech: | Příprava, exprese a purifikace konstruktů rekombinantních polymeráz |
---|---|
Thesis title in English: | Cloning, expression and purification of recombinant polymerases |
Key words: | klonování, produkce rekombinantních proteinů, krystalografie |
English key words: | cloning, expression of recombinant proteins, crystallography |
Academic year of topic announcement: | 2018/2019 |
Thesis type: | Bachelor's thesis |
Thesis language: | čeština |
Department: | Department of Biochemistry (31-250) |
Supervisor: | prof. RNDr. Jan Konvalinka, CSc. |
Author: | |
Advisors: | RNDr. Mgr. Jan Šilhán, Ph.D. |
Preliminary scope of work |
Studenti budou vedeni k samostatné vědecké činnosti. Jejich úkolem bude nastudovaní literatury na danou tématiku a po konzultaci s vedoucím bude následovat návrh experimentů a stručná teoretická průprava jejich provedení. Studenti si zajistí potřebný materiál a začnou s klonováním genů příslušných polymeráz do plazmidů pro expresse rekombinantní proteinů v E.coli a ve hmyzích buňkách Sf9 pomocí baculovirového systému. Hlavním úkolem bude optimalizace produkce a purifikace rekombinantních proteinů. Při zvládnutí těchto procedur bude následovat biofyzikální charakterizace a studium enzymové kinetiky. Velký důraz bude kladen na vyřešení struktury polymerázy pomocí proteinové krystalografie. |