Detekce CD molekul v reprodukčním traktu a gametách a jejich funkce v reprodukci savců
Thesis title in Czech: | Detekce CD molekul v reprodukčním traktu a gametách a jejich funkce v reprodukci savců |
---|---|
Thesis title in English: | Detection of CD molecules in reproductive tract and gamates and their function in reproduction of mammals |
Key words: | molekuly CD; oocyt; spermie; reprodukce |
English key words: | CD molecules; oocyt; spermatozoa; reproduction |
Academic year of topic announcement: | 2016/2017 |
Thesis type: | Bachelor's thesis |
Thesis language: | čeština |
Department: | Department of Biochemistry (31-250) |
Supervisor: | RNDr. Pavla Postlerová, Ph.D. |
Author: | hidden - assigned by the advisor |
Date of registration: | 18.11.2016 |
Date of assignment: | 18.11.2016 |
Date of electronic submission: | 25.05.2018 |
Opponents: | prof. RNDr. Helena Ryšlavá, CSc. |
Preliminary scope of work |
Součástí procesu oplodnění u savců je kooperace gamet, resp. molekul, na úrovni buňky i celého organizmu. V současnosti se uvažuje o několika diferenciačních antigenech (CD molekulách), které by mohly sehrát úlohu v různých krocích fertilizace. Většina z nich jsou glykoproteiny s různými funkcemi v imunitním systému, některé byly popsány na buňkách a tkáních reprodukčního traktu. Dodnes však není znám mechanizmus, kterým se tyto molekuly účastní dozrávání pohlavních buněk a procesu oplodnění. Navíc jejich funkce na spermiích různých druhů savců během procesu reprodukce nebyla dosud detailně studována. Proto analýza diferenciačních antigenů detekovaných na epididymálních a ejakulovaných spermiích kance, býka, popř. člověka jakož i spermiích kapacitovaných a akrosomově zreagovaných v podmínkách in vitro a studium interakce spermie a zona pellucida vajíčka by mohly přispět k objasnění jednotlivých kroků a mechanismů reprodukčního děje na molekulární úrovni. V konečném důsledku by získané výsledky mohly přispět k vysvětlení příčin některých poruch plodnosti. Cílem je studium molekul CD46, CD52, CD9 a CD81 na býčích a kančích, popř. lidských spermiích s využitím monoklonálních protilátek v různých fázích procesu oplodnění. Pokusíme se o lokalizaci těchto diferenciačních antigenů v rámci struktur pohlavních buněk a budeme sledovat jejich případnou modifikaci během reprodukčního procesu. Metodika: extrakce proteinů, izolace proteinů z povrchu spermie, SDS-elektroforesa, Western blot, imunodetekce, změny v glykosylaci (vazba lektinů), nepřímá imunofluorescenční mikroskopie na buňkách a řezech, PCR |