Příprava glutamátkarboxypeptidasy III v savčím expresním systému

• Thesis title in Czech: Příprava glutamátkarboxypeptidasy III v savčím expresním systému
• Thesis title in English: Preparation of glutamate carboxypeptidase III using mammalian expression system
• Key words: GCPIII, glutamátkarboxypeptidasa III, HEK 293–6E, exprese proteinů, savčí expresní systém
• English key words: GCPIII, glutamate carboxypeptidase III, HEK 293–6E, protein expression, mammalian expression system
• Academic year of topic announcement: 2015/2016
• Thesis type: Bachelor's thesis
• Thesis language: čeština
• Department: Department of Physical and Macromolecular Chemistry (31-260)
• Supervisor: prof. RNDr. Jan Konvalinka, CSc.
• Author: hidden - assigned by the advisor
• Date of registration: 02.11.2015
• Date of assignment: 02.11.2015
• Date of electronic submission: 26.05.2017
• Date of proceeded defence: 14.06.2017
• Opponents: prof. RNDr. Tomáš Obšil, Ph.D.
• Advisors: RNDr. Pavel Šácha, Ph.D.

Preliminary scope of work

Protein glutamátkarboxypeptidasa III (GCPIII) je homologem už zavedeného prostatického nádorového markeru glutamátkarboxypeptidasy II (GCPII, také nazývaného „prostate specific membrane antigen“ – PSMA). V naší laboratoři připravujeme model myši s vyřazeným genem GCPIII pro studium její funkce. Pro enzymologická studia bude potřeba připravit myší rekombinantní protein. Úkolem bakalářské práce bude připravit extracelulární část myší GCPIII expresí v savčím expresním systému a porovnat její vlastnosti s proteinem exprimovaným v S2 hmyzích buňkách pomocí biofysikálních method (thermofluor, SDS elektroforesa, hmotnostní spektrometrie) i stanovením kinetických parametrů specifických substrátů (substrátů beta-citrylglutamátu a N-acetylaspartylglutamátu) a inhibitorů.