skrytý - zadáno vedoucím/školitelem, čeká na schválení garantem
Datum přihlášení:
29.11.2010
Datum zadání:
29.11.2010
Datum odevzdání elektronické podoby:
08.05.2012
Datum proběhlé obhajoby:
29.05.2012
Oponenti:
doc. RNDr. Pavla Jendelová, Ph.D.
Konzultanti:
RNDr. Jan Moravec, Ph.D.
Předběžná náplň práce
Polydendrocyty (NG2 glie), byly popsány v dospělém mozku savců teprve nedávno a jejich funkce ve zdravé či poškozené nervové tkáni není zatím plně objasněna. Fungují jako prekurzory oligodendrocytů během neurálního vývoje i po jeho dokončení, zatímco v poraněné nervové tkáni polydendrocyty proliferují a pravděpodobně diferencují i v jiný typ buněk. Cílem této diplomové práce je objasnění funkce polydendrocytů (NG2 glií) v regeneraci ischemicky poškozené nervové tkáně s využitím transgenního kmene myší (Cspg4-cre/Z/EG). U tohoto kmene myší dochází k aktivaci přepisu zeleného fluorescenčního proteinu (EGFP) pouze v buňkách, které exprimují NG2-proteglykan, tedy marker polydendrocytů. Polydendrocyty budou především studovány in vitro, po izolaci z nepoškozené a ischemicky poškozené nervové tkáně, a hlavní část diplomové práce bude zaměřena na objasnění diferenciačního potenciálu polydenrocytů a jeho možné ovlivnění růstovými faktory. V průběhu řešení daného tématu bude použita řada metod;především indukce fokální cerebrální ischemie (MCAO), kultivace buněk, imunocytochemie a metoda terčíkového zámku (patch-clamp).
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
In healthy or damaged neural tissue the role of NG2-glia or polydendrocytes, the last discovered type of the glial cells in the adult mammalian brain, remain still unclear. They may function as oligodendrocyte precursors during the neural development as well as after its completion, they increase proliferation rate after neural tissue injury and probably differentiate into another cell type. The aim of this diploma thesis is to elucidate the function of polydendrocytes in CNS tissue regeneration after focal cerebral ischemia using transgenic mouse strain (Cspg4-cre/Z/EG). In this mouse strain green fluorescent protein (EGFP) is present only in the cells that express NG2-proteoglycan (marker of polydendrocytes) and in their progeny. Polydendrocytes will be studied in vitro, after their isolation from non-injured brain as well as nervous tissue after focal cerebral ischemia. The main part of the diploma thesis will be focused on differentiation potential of polydendrocytes and its affection by growth factors. A number of methods will be employed: induction of focal cerebral ischemia (MCAO), cell cultivation, immunocytochemistry, and patch clamp method in whole-cell configuration.