Témata prací (Výběr práce)Témata prací (Výběr práce)(verze: 384)
Detail práce
   Přihlásit přes CAS
Exprese a vazebné vlastnosti lidského galektinu-4
Název práce v češtině: Exprese a vazebné vlastnosti lidského galektinu-4
Název v anglickém jazyce: Expression and binding properties of human galectin-4
Klíčová slova: galektin-4, sacharid, inhibice, ELISA
Klíčová slova anglicky: galectin-4, carbohydrate, inhibition, ELISA
Akademický rok vypsání: 2020/2021
Typ práce: bakalářská práce
Jazyk práce: čeština
Ústav: Katedra biochemie (31-250)
Vedoucí / školitel: doc. RNDr. Pavla Bojarová, Ph.D.
Řešitel: skrytý - zadáno a potvrzeno stud. odd.
Datum přihlášení: 11.11.2020
Datum zadání: 18.11.2020
Datum potvrzení stud. oddělením: 18.11.2020
Datum odevzdání elektronické podoby:12.12.2023
Datum proběhlé obhajoby: 30.01.2024
Oponenti: RNDr. Daniel Kavan, Ph.D.
 
 
 
Konzultanti: Ing. Kristýna Slámová, Ph.D.
Seznam odborné literatury
M. T. Elola, A. G. Blidner, F. Ferragut, C. Bracalente, G. A. Rabinovich, Biochem. J. 2015,469, 1-16.
A. Satelli, P. S. Rao, S. Thirumala, U. S. Rao, Int. J. Cancer 2011,129, 799-809.
H. Barrow, X. Guo, H. H. Wandall, J. W. Pedersen, B. Fu, Q. Zhao, C. Chen, J. M. Rhodes, L.-G. Yu, Clin. Cancer Res. 2011,17, 7035-7046.
Předběžná náplň práce
Galektiny jsou skupina živočišných proteinů specificky vázajících oligosacharidy obsahující galaktosu na neredukujícím konci. Mají zásadní roli v obranných mechanismech, buněčné proliferaci, apoptóze, adhezi a migraci. Dosud je známo jen málo informací o patofyziologii galektinu-4 (Gal-4). Jeho výrazně snížená exprese v tkáni pevného kolorektálním tumoru stimuluje progresi tumoru a tvorbu metastáz, zatímco v krevním séru pacientů s kolorektálním karcinomem byla pozorována významně zvýšená hladina galektinu-4 ve srovnání se zdravou populací. Galektin-4 patří mezi galektiny tzv. tandemového typu, jedná se o kovalentní heterodimer s různými vazebnými doménami na každé podjednotce.
Cílem této práce je rekombinantně exprimovat lidský galektin-4 a stanovit jeho vazebnou afinitu k vybraným sacharidovým ligandům metodou ELISA. Získané výsledky přispějí k porozumění významu galektinu-4 jako nového biomarkeru kolorektální rakoviny.

Cíle práce:
· exprese lidského galektinu-4 z plasmidu připraveného v laboratoři v Escherichia coli a jeho purifikace afinitní chromatografií
· optimalizace imunochemického stanovení ELISA pro měření vazebné afinity galektinu-4 k sacharidovým ligandům
· stanovení afinity galektinu-4 k vybraným sacharidovým ligandům a diskuze získaných výsledků

Metody: práce s DNA, transformace a kultivace E. coli, chromatografická purifikace lektinů, imunochemické stanovení.
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
Galectins are a family of animal proteins that specifically bind oligosaccharides containing galactose at the non-reducing end. They play a crucial role in defense mechanisms, cell proliferation, apoptosis, adhesion, and migration. To date, little information is known on the pathophysiology of galectin-4 (Gal-4). Its strongly decreased expression in the tissue of solid colorectal carcinoma stimulates its progression and metastasis whereas significantly increased levels of galectin-4 have been observed in the blood serum of colorectal cancer patients compared to the healthy population. Galectin-4 belongs to the galectins of the so-called tandem repeat type, it is a covalent heterodimer with different binding domains on each subunit.
The aim of this work is to recombinantlyo express human galectin-4 and to determine its binding affinity to selected carbohydrate ligands by ELISA. The obtained results will contribute to understanding of the importance of galectin-4 as a new biomarker of colorectal cancer.

Goals of the thesis:
· Expression of human galectin-4 from a plasmid prepared in the laboratory in Escherichia coli and its purification by affinity chromatography
· Optimization of immunochemical ELISA assy for measuring the binding affinity of galectin-4 to carbohydrate ligands
· Determination of the affinity of galectin-4 to selected carbohydrate ligands and discussion of the results obtained

Methods: work with DNA, transformation and cultutivation of E. coli, chromatographic purification of lectins, immunochemical assay.
 
Univerzita Karlova | Informační systém UK