Vliv NADPH oxidázy na architekturu a funkci β buněk a Langerhansových ostrůvků

• Název práce v češtině: Vliv NADPH oxidázy na architekturu a funkci β buněk a Langerhansových ostrůvků
• Název v anglickém jazyce: The role of NADPH oxidase in architecture and function of β cells and Langerhans Islets
• Klíčová slova: NADPH oxidáza, NOX4, β buňky, diabetes, redoxní signalizace, Langerhansovy ostrůvky, reaktivní formy kyslíku
• Klíčová slova anglicky: NADPH oxidase, NOX4, β cells, diabetes, redox signaling, Langerhans islets, reactive oxygen species
• Akademický rok vypsání: 2018/2019
• Typ práce: diplomová práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra buněčné biologie (31-151)
• Vedoucí / školitel: RNDr. Lydie Plecitá, Ph.D.
• Řešitel: Mgr. Štěpánka Benáková - zadáno vedoucím/školitelem, čeká na schválení garantem
• Datum přihlášení: 19.11.2018
• Datum zadání: 19.11.2018
• Datum odevzdání elektronické podoby: 03.06.2020
• Datum proběhlé obhajoby: 14.07.2020
• Oponenti: Mgr. Kristina Bardová, Ph.D.

Předběžná náplň práce

Na procesu výlevu inzulinu z β buněk se podílí mnoho molekul buněčného metabolismu. Dosud je nejméně objasněn vliv redoxní rovnováhy. Objektem našeho zájmu je signalizace pomocí endogenních reaktivních kyslíkových radikálů (ROS) z NADPH oxidázy izoformy 4 (NOX4). Výsledky studující laboratoře ukázaly, že NOX4 se podílí na výlevu inzulinu, glukózové homeostáze a endokrinní i parakrinní signalizaci β buněk Langerhansových ostrůvků (LO). Předpokládá se, že NOX4 aktivita by mohla mít dále vliv na maturaci β buněk, složení a architekturu LO. Cílem diplomové práce by mělo být ověření těchto hypotéz, objasnění vlivu narušení redoxní rovnováhy na architekturu LO a funkčnost endokrinních buněk v závislosti na stáří, přítomnosti proteinu NOX4 a různých nutričních zdrojích.
Charakterizace LO slinivky proběhne imunohistologickými technikami, kde budeme sledovat hormony endokrinních buněk a proteiny glukózové senzorické dráhy. Dospělá zvířata budou po odstavu rozdělena do skupin krmených klasickou, na sacharidy bohatou a speciální vysokotukovou stravou a taktéž dle věku (právě odstavená mláďata, dospělí jedinci a popř. staří). Paralelně budeme sledovat chování INS1-E buněk (kontroly, NOX4 silencovaných a NOX4 overexprimovaných) bez či po indukci glukózou. Expresi genů zkontrolujeme analýzou RT-PCR a proteinovou imunodetekcí pomocí Western blotu (s kontrolním genem a produktem NOX4).