Radioaktivní značení ramucirumabu s následnou studií jeho internalizace in vitro

• Název práce v češtině: Radioaktivní značení ramucirumabu s následnou studií jeho internalizace in vitro
• Název v anglickém jazyce: Radiolabeling of ramucirumab followed with the study of its internalization in vitro
• Klíčová slova: HPLC, iTLC, radiodetekce, in vitro internalizace, radioaktivní značení
• Klíčová slova anglicky: HPLC, iTLC, radiodetection, in vitro internalization, radiolabeling
• Akademický rok vypsání: 2016/2017
• Typ práce: diplomová práce
• Jazyk práce: čeština
• Ústav: Katedra biofyziky a fyzikální chemie (16-16110)
• Vedoucí / školitel: Mgr. Pavel Bárta, Ph.D.
• Řešitel: RNDr. Jakub Gajdoš - zadáno vedoucím/školitelem
• Datum přihlášení: 28.11.2016
• Datum zadání: 28.11.2016
• Datum a čas obhajoby: 05.06.2018 08:30
• Datum odevzdání elektronické podoby: 03.05.2018
• Datum proběhlé obhajoby: 05.06.2018
• Oponenti: Mgr. Monika Kuchařová, Ph.D.

Zásady pro vypracování

1. Vyhledání dostupných informací k zadané tématice v odborné literatuře a informačních databázích.
2. Osvojení techniky práce s buněčnými kulturami, radioaktivními ligandy a přístroji na oddělení radionuklidové laboratoře.
3. Vyhodnocení získaných výsledků a jejich konfrontace s teoretickými poznatky.
4. Shrnutí získaných teoretických poznatků, vlastní experimentální práce, experimentálních výsledků a jejich následné diskuse v diplomové práci v českém jazyce.

Seznam odborné literatury

1. Björke H, Andersson K. Measuring the affinity of a radioligand with its receptor using a rotating cell dish with in situ reference area. Appl Radiat Isot. 2006 Jan;64(1):32-7.
2. Björke H, Andersson K. Automated, high-resolution cellular retention and uptake studies in vitro. Appl Radiat Isot. 2006 Aug;64(8):901-5.
3. Bigott-Hennkens HM, Dannoon S, Lewis MR, Jurisson SS. In vitro receptor binding assays: general methods and considerations. Q J Nucl Med Mol Imaging. 2008 Sep;52(3):245-53.
4. Levente K. Meszaros, Anica Dose, Stefano C.G. Biagini, Philip J. Blower. Hydrazinonicotinic acid (HYNIC) – Coordination chemistry and applications in radiopharmaceutical chemistry. Inorganica Chimica Acta. 2010; 363:1059–1069.
5. Otrock Z.K., Makarem J.A., Shamseddine A.I. Vascular endothelial growth factor family of ligands and receptors: Review. Blood Cells Mol Dis. 2007; 38(3):258-68.

Předběžná náplň práce

Student se seznámí s poznatky v oblasti problematiky VEGFR2 prostřednictvím odborné literatury. Experimentální diplomová práce bude zaměřena na sledování vlivu radioaktivního značení monoklonální protilátky ramucirumabu na její afinitu v in vitro podmínkách. Bude se zejména hodnotit možnost internalizace této protilátky do buněčných kultur přes VEGFR2 receptor. Sledování internalizace se provede pomocí manuální techniky a automatické radioimunoanalýzy. Student bude pracovat v prostředí radionuklidové laboratoře, proto si osvojí bezpečnost práce s radioaktivními zářiči. V rámci experimentů si student bude radioaktivně značit danou protilátku a bude provádět buněčnou kultivaci. Výsledky měření pomocí manuální techniky se vyhodnotí v programu Excel a GraphPad. Experimenty změřené na přístroji pro automatickou radioimunoanalýzu v reálném čase se budou vyhodnocovat pomocí softwaru TraceDrawer. Veškeré teoretické a praktické poznatky stejně tak jako výsledky a jejich diskuse budou shrnuty v diplomové práci.

Předběžná náplň práce v anglickém jazyce

The student will get the information about the VEGFR2 topic from the literature. The experimental diploma thesis will be focused on the possible influence of radiolabeling on monoclonal antibody ramucirumab affinity in vitro. The student will assess the possibility of antibody internalization in to cell lines via VEGFR2. The internalization assessment will be tested with the employment of either the manual technique or automatic radioimmunoassay. The student will work in the laboratory with radionuclides, therefore he will adopt the security work with radionuclides. He will make radiolabeling of monoclonal antibody and cell culturing. The result data from the manual technique will be evaluated in Excel and GraphPad program. The experiments carried out with the real-time automatic radioimmunoassay will be evaluated in TraceDrawer program. The all theoretical and practical findings, results and the discussion will be summarized in the diploma thesis.