Témata prací (Výběr práce)Témata prací (Výběr práce)(verze: 384)
Detail práce
   Přihlásit přes CAS
Uloha kataninu, ATPázy štěpící mikrotubuly, při modulaci buněčné motility a proliferace glioblastomových buněk.
Název práce v češtině: Uloha kataninu, ATPázy štěpící mikrotubuly, při modulaci buněčné motility a proliferace glioblastomových buněk.
Název v anglickém jazyce: Uloha kataninu, ATPázy štěpící mikrotubuly, při modulaci buněčné motility a proliferace glioblastomových buněk.
Klíčová slova: glioblastom, motilita, proteiny štěpící mikrotubuly, katanin
Klíčová slova anglicky: glioblastom, motility, microtubule severing proteins, katanin
Akademický rok vypsání: 2013/2014
Typ práce: diplomová práce
Jazyk práce: angličtina
Ústav: Katedra buněčné biologie (31-151)
Vedoucí / školitel: doc. RNDr. Pavel Dráber
Řešitel: skrytý - zadáno vedoucím/školitelem, čeká na schválení garantem
Datum přihlášení: 18.06.2014
Datum zadání: 18.06.2014
Datum odevzdání elektronické podoby:11.07.2016
Datum proběhlé obhajoby: 15.09.2016
Oponenti: RNDr. Lenka Libusová, Ph.D.
 
 
 
Předběžná náplň práce
Glioblastomy jsou nejčastější a nejzhoubnější typy nádorů mozku. Pro svůj agresivní charakter jsou tyto nádory neléčitelné konvenčními terapeutickými přístupy. Bylo prokázáno, že v buněčných liniích glioblastomů i v glioblastomech je zvýšená exprese nekterých mikrotubulárních proteinů, zejména βIII-tubulinu, γ-tubulinu, a spastinu; proteinu štěpícího mikrotubuly. Tato diplomová práce je zaměřená na expresi, buněčnou distribuci a funkci kataninu, dalšího proteinu, který štěpí mikrotubuly, v glioblastomových buněčných liniích. Katanin má katalytickou (p60) a regulační (p80) podjednotku. Exprese a buněčná lokalizace obou podjednotek byla studována na panelu lidských glioblastomových liniích izolovaných z glioblastomů dospělých (T98G, U87MG, U118MG a U138 MG) nebo dítěte (KNS42). V porovnání s netransformovanými lidskými astrocyty byla zvýšená exprese obou podjednotek kataninu jak na úrovni transkriptu tak i proteinu v buněčných liniích T98G, U87MG a KNS42, nikoli však v liniích U138MG a U118MG. Immunofluorescenční mikroskopie ukázala difuzní distribuci obou podjednotek kataninu v celé buňce, jejich koncentraci na pólech dělícího vřeténka mitotických buněk a na vedoucím okraji u migrujících buněk. Podle výsledků měření buněčné migrace, koreluje rychlost migrace glioblastomových buněk s mírou exprese podjednotek kataninu. Buňky T98G a U87MG se pohybovaly výrazně rychleji než buňky U118MG a U138MG. Snížení exprese p60 nebo p80 podjednotky kataninu pomocí siRNA vedlo ke snížení migrace T98G a U87MG. Tyto výsledky byly u T98G buněk dále podpořeny i testem radiální buněčné migrace. Deplece podjednotek kataninu u T98G a U87MG buněk vedla ke snížení proliferace.
Na základě prezentovaných výsledků lze shrnout, že zvýšená exprese kataninu v glioblastomových buňkách může být spojena s proliferací, migrací a invazivitou glioblastomů.
Předběžná náplň práce v anglickém jazyce
Glioblastomas are the most common and the deadliest types of brain tumours. Due to their highly invasive behaviour, they are incurable by convencial therapeutical strategies. It was shown that some components of microtubules, namely class III β-tubulin, γ-tubulin and microtubule severing protein spastin are overexpressed in glioblastoma cell lines as well as glioblastomas. This diploma thesis is focused on the expression, subcellular distribution and function of katanin, another microtubule-severing enzyme, in gliobastoma cell lines. Katanin is formed by catalytic (p60) and regulatory (p80) subunits. Expression and cellular localization of both katanin subunits was studied in panel of human glioblastoma cell lines isolated form adults (T98G, U87MG, U118MG and U138 MG) and child (KNS42). Data presented in this thesis demonstrated that katanin subunits were overexpresed both on transcript and protein levels in T98G, U87MG and KNS42 cell lines, but not in U138MG and U118MG cell lines when compared to normal non-transformed human astrocytes. Immunofluorescence microscopy revealed that both katanin subunits were diffusively distributed in cytoplasm and concentrated on spindle poles of mitotic cells and on leading edges of migrating cells. Examination of cell motility revealed that velocities in glioblastoma cell lines corelated with protein levels of both katanin subunits. T98G and U87MG cells migrated significantly faster when compared to U118MG and U138 MG cells. Depletion of either p60 or p80 katanin subunits by siRNA in T98G and U87MG cells resulted in reduced cell motility. These results were in T98G cell supported by a radial cell migration assay. Moreover, proliferation in T98G and U87MG cells was inhibited in katanin-depleted cells.
Collectively, presented results indicate, for the first time, that enhanced expression of katanin in glioblastoma cells might be linked to tumour cell proliferation, migration, and invasion.
 
Univerzita Karlova | Informační systém UK